血型鉴定基本知识2013.8.27.ppt

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1、血型鉴定基本知识血型的种类1900年奥地利科学家兰德斯坦纳经过研究,将人的血液分为A型、B型、AB型、O型四种,也就是ABO血型。除了ABO血型系统外,人类还有一些其它的血型系统,比如Rh血型系统等。Rh阳性血型在中国汉族及大多数民族人中约占99.7%,个别少数民族约为90%。在中国,RH阴性血型只占千分之三到四。RH阴性A型、B型、O型、AB型的比例是3:3:3:1。ABO血型鉴定定义ABO血型鉴定,即指ABH血型抗原的检测。红细胞含A抗原的叫A型,含B抗原的叫B型,含A和B抗原的叫AB型;不含A、B抗原,而含H抗原的称O型。正常范围ABO血型分为A型、B型、O型、AB型。临

2、床意义ABO血型鉴定主要用于:1、临床输血:当循环血量不足或大失血或贫血需进行输血治疗,在输血前必须先选择血型相同的供血者,再进行交叉配血,完全相同后才能输血。2、在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体。3、不孕症和新生儿溶血症病因的分析。4、亲子鉴定等。鉴定原理常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。ABO血型定型原则认

3、识ABO血型知识链血浆血细胞白细胞血小板红细胞红细胞A凝集原B凝集原认识ABO血型凝集原凝集原(红细胞)ABA和B无血型ABABOA凝集原B凝集原血清抗A凝集素抗B凝集素(抗A)(抗B)凝集素凝集原凝集原(红细胞)ABA和B无血型ABABO凝集素(血清)抗B抗A无抗A和抗B血型可接受血型不可接受血型ABOABB、OA、ABAB、A、B、OA、O无A、AB、BB、AB输血原则:同型血液可以互相输,O型血可以少量输给其他三种血型的人,AB型血原则上可以接受其他三种血型的血。O(万能输血者)(万能受血者)方法学原理根据红细胞膜表面有无A抗原和(或)B抗原,将血型分为A,B,AB,O型

4、4种。可利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定ABO血型。所谓的正定型是指用标准抗A抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或(和)B抗原;所谓的反定型,是指用标准的A型、B型细胞来测定血清中有无抗A和(或)抗B。试剂及配套品抗A,抗B和抗0的标准血清。准血清均采自健康人,并应符合下述条件:①特异性:只能与相应的红细胞抗原发生凝集,无非特异性凝集。②效价:我国标准抗A和抗B血清效价均在1:128以上。③亲和力:我国标准要求抗A对A1、A2及A2B发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s;抗B对B型红细胞开始出现凝集的时间为15s。凝集强度为3min时,凝块不小

5、于1-2mm。④冷凝集素效价:在1:4以下。⑤无菌。⑥灭活补体。操作步骤玻片法正定型1、取清洁玻片1张,用蜡笔划成方法,标明抗A,抗B,分别滴家抗A,抗B血清在相应的方格内,再加受检者红细胞1滴,混匀。2、将玻片轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连续约1-5MIN,肉眼观察有无凝集反映,也可以用低倍镜观察结果。注意事项1、所用器材必须干燥清洁、防止溶血,凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染,建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室温后再用,用毕后应尽快放回冰箱保存。2、加试剂顺序:一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实是否漏加血清。3、虽然IgM抗A和抗B与相

6、应红细胞的反应温度以4℃最强,医学教育网收集整理但为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温20℃~24℃内进行试验,而37℃条件,可使反应减弱。4、幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好采用试管法鉴定血型。注意事项5、玻片法反应时间不能少于10min,否则较弱凝集不能出现,造成假阴性。6、正、反定型结果一致才可发报告。7、反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制,血型抗体可减弱或消失;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难;新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因而出生6个月以内的婴儿

7、不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗体,可引起假阴性或血型鉴定错误。婚配式 子女可能有的血型 子女不可能有的血型婚配式 子女可能有的血型 子女不可能有的血型鉴定方法1)生理盐水凝集法:①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱,如抗A

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