不同规模化种猪场经产母猪猪瘟抗体检测与免疫效果分析.pdf

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1、《黑龙江畜牧兽医》综合版2014年09月(下)91不同规溪化冲猪场经产母措搐瘟抗体检测与免疫效果分折余勋信，林秋敏，赖宝色(福建农业职业技术学院，福州350119)中图分类号：$852．651文献标识码：B文章编号：1004—7034(2014)09—0091—02目前，我国防控猪瘟的主要手段仍然以高密度防器振荡，将反应板中的溶液混匀后放于25℃温箱中疫为主，实践中猪瘟免疫失败的现象时有发生，因此孵育2h；甩掉板孔中的溶液，用300txL的洗涤液洗了解猪场猪瘟免疫抗体的情况，为猪瘟的防控提供依涤每个板孔，重复

2、3次，晾干；每孔加入100IxL辣根据具有重要意义。过氧化物酶(HRPO)标记的抗猪瘟病毒的酶标抗体，酶联免疫吸附试验(ELISA)作为目前应用最广、25下孵育30min；甩掉板孔中的溶液，用300ixL发展最快的免疫检i贝4技术，是检测猪群抗体的主要方的洗涤液洗涤每个板孔，重复3次，晾干；每孔加入法，也是监测免疫后猪群抗体水平和评价免疫效果的100IxL底物溶液(加完第一孔后即可计时)，于避光、主要手段]。笔者对8个不同规模猪场的母猪群的25cI=条件下放置显色10min；每孔加入100L终止血清，用IDE

3、XX公司的Herdchek猪瘟抗体检测试剂液终止反应，加终止液的顺序与底物加入的顺序相盒测定抗体水平，对猪瘟抗体不合格的种猪加强接种同；用酶标仪测定每孔吸光度OD。值。1次猪瘟活疫苗，28d后再检测其猪瘟抗体，对第2．2判定标准2次猪瘟抗体检测不合格的种猪进行淘汰，并初步分阴性对照的平均OD。>0．50，阳性对照的阻断析以抗体检测为基础的猪瘟免疫效果，为进一步实施率I>50％，检测结果判定为有效。通过计算每个样品有效防控猪瘟提供依据。的阻断率判定CSFV抗体水平，猪瘟抗体阻断率≥1材料50％时，检i贝0结果为

4、合格。1．1血清3结果2013年8—11月份，采集福建省8个不同规模3．1不同规模猪场种猪群猪瘟抗体检测结果种猪场(编号A～H)经产母猪血样共4213份，按常应用IDEXX猪瘟抗体ELISA检测试剂盒检测了规方法分离血清，置冰箱中一20cI=保存，待测。8个不同规模种猪场的4213份经产母猪的血清，检1．2试剂和设备测结果见表1和表2。从表1可以看出，8个猪场经Herdehek猪瘟抗体检测试剂盒(CSFVAb)购自产母猪群体猪瘟抗体平均合格率(抗体阻断率≥北京爱德士元亨生物科技有限公司；微量移液器购自50％)

5、为82．9％，猪瘟抗体平均不合格率(抗体阻断德国Eppendof公司；雷勃MK3酶标仪购自美国率<50％)为17．1％，其中经产母猪群体猪瘟抗体不Thermofisher；恒温箱水浴锅、离心机购自北京市六一合格率最高的是A场，占36．1％；最低的是G场，占仪器厂。10．6％；A场和F场(小于300头经产母猪场)的猪2方法瘟抗体合格率最低，均低于80％。结果表明，不同规2．1操作步骤模猪场经产母猪猪瘟抗体的整齐度存在差异。统计将所有的试剂盒组分恢复到室温。试剂均通过不同存栏数的规模猪场经产母猪猪瘟抗体合格率，结

6、轻轻涡旋、旋转混合均匀。先将5OL样品稀释液加果见表2，存栏数超过550头的猪场经产母猪群体猪人每个检测孔和对照孔中；然后分别将5O的阳性瘟抗体合格率最高(89％)；猪场规模越小，种猪猪瘟对照血清和阴性对照血清加人到相应的对照孔中；再抗体合格率越低。将5OL的被检血清加入到剩下的检测孔中；用振荡3．2猪瘟抗体不合格群体加强免疫后猪瘟抗体检测结果(见表3)收稿日期：2014—02—20；修回日期：2014—03—28作者简介：余勋信(1968一)，男，副教授／高级兽医师，本科，主从表3可以看出，8个种猪场经产母

7、猪群种猪加要从事动物疫病防控的教学与科研工作，yxx668606@163．强免疫后，群体猪瘟抗体水平有一定的提升，猪瘟抗体平均合格率达到95．42％，比首次检测提高了10．71％，HeilongjiangAnimalScienceandVeterinaryMedicineNo092014表1不同规模种猪场经产母猪猪瘟抗体检测结果因此，在猪瘟的控制过程中，保证种猪群有一个较高的、稳定的猪瘟抗体水平对整个猪场猪群的健康至关重要。本试验选用抗体阻断率为50％作为判定种猪猪瘟抗体合格的判定标准。从检测结果可以看出，不

8、同规模种猪场经产母猪猪瘟抗体合格率均存在差异，规模越小的猪场种猪猪瘟抗体合格率越低。猪场的猪瘟抗体合格率要求在90％以上J，而本次检查的种猪猪瘟抗体合格率却无超过90％的猪场，说明规模化猪场的猪瘟抗体相对不稳定。分析猪瘟不稳定猪注：合格样本数指猪瘟抗体阻断率350％的样本数。场种猪猪瘟抗体不合格的原因可能有：疫苗免疫操作不当造成抗原量不足以诱导猪体产生免疫应答反应；表2不同规模种猪场问经产母猪猪瘟抗