高效液相色谱仪使用方法及管理维护.doc

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1、高效液相色谱仪使用方法及管理维护一．操作流程：1)打开计算机后自动弹开＜CAGBootpserver＞→菜单→通信成功。2)打开色谱仪开关，进入在线工作站。(红色:未就绪)3)预热30min即可。(黄→未就绪，绿→已就绪，蓝→采集数据，红→报警)4)设置泵。点击＜泵＞＜检测器＞开关，左键点击＜泵＞→＜Solventbottles＞→＜SolventBottlesFillng:Instrument1＞设置每瓶中实际液体量、最低液体量及瓶容量。5)排气泡。若新换流动相或长时间没开机，应向左旋开排气阀，逐个流动相瓶排气泡，排气时应逐渐升高流速

2、(1～2mL/min)，再逐渐降低流速。(1)在对话框中点击相应瓶A、B、C、D图标→＜SetupPump…＞。(2)出现＜SetupPump:Instrument1＞→设置＜Flow＞流速为1.0和瓶B、C、D的百分比(例如:A为100、B为0、C为0、D为0)即排A内的空气){＜PressureLimits＞(压力)0～200之间;＜Timetable＞(设置梯度洗脱)。}(3)改变流速为1.5→OK!(当没有气泡即洗脱完毕，向右旋关闭排气阀，最后将流速调至使用流速———大约1.0mL/min。)依次排B、C、D的气泡。6)编辑检测

3、方法。(1)首先编辑方法前将排气阀门关闭，将流速逐渐降至1.0mL/min。(2)点击＜Method＞→＜EditEntireMethod＞。(3)弹出对话框＜EditMethod:Instrument1＞a方法信息;b参数设置(可设置流量、波长、溶剂配比);c数据分析、报告处理(一般不选);d运行时间表。(4)点击＜OK＞进入＜MethodComments＞，可输入实验名称，也可不选，在后面也会提示输入。7)参数设定。点击＜OK＞进入参数设定(根据文献或实验方法设定)。(1)＜Control＞(流速):一般为1～2mL/min。(2)

4、＜Solvents＞(溶剂名称及配比)。(3)＜PresswreLimits＞(压力限)Max:300bar(压力保护限，默认);Min:0bar。(4)＜Timetable＞(洗脱梯度)一般为:一种溶剂配比递增或递减。(5)点Display选择显示方式。(6)点＜OK＞→＜VWDSignal:Instrument1＞(检测器设置)对话框，＜Wavelength＞(波长)，＜Peakiwidth＞(检测器响应时间):默认为＞0.1min(2s)。(7)点击＜OK＞→＜ＲunTimeChecklist:Instrument1＞对话框，选中

5、＜DataAequistion＞和＜StandardDataAnalysis＞。(8)点击＜OK＞(存储检测方法):点＜SaveMethodas＞进入对话框，可输入名称和注释，也可不输，然后点＜OK＞结束方法存储。8)基线调节。(1)点击界面左下角“三箭头”显示＜OnlinePlot＞对话框，观察基线是否平稳(波动在0.05个单位之间)＜Adjust＞(复位)，＜Balance＞(强制使基线归零)。(2)点击＜Change…＞(调节):基线走速(x轴)、吸收单位(y轴)、图表显示曲线数量，点＜OK＞结束进样前设置。9)样品信息。点击＜Ｒ

6、unMethod＞(运行方法)→＜SimpleInfo…＞→＜Sampleinfo:instrument1＞:＜OperatorName＞(操作者姓名)、＜DataFile＞中选＜ManualFileName＞:(输入文件名)(必须每次输入新名，否则覆盖前一次测试结果)，Subdirectory:(文件存储名)，SimpleName:(样品名)，SimpleAmount:(进样量)，点＜OK＞结束样品信息输入。10)开始进样。进样量一般5～25μL。(仪器配有自动进样器)。11)停止采样。峰出完后按＜F8＞或者＜stop＞停止(也可在＜

7、Ｒuncontrol＞下拉菜单中关闭)，自动出现图表。可直接打印，也可进行峰型优化后再打印。12)峰优化。打开＜offline＞(离线)，点击＜File＞→＜Loadsignal＞调出文件(或者点击界面图标打开):(1)打开文件保存的所在位置。(2)点击＜Graphics＞→＜SignalOptions…＞可以进行优化处理。(3)选择＜Autoscale＞可以进行自动谱图优化。(4)点击＜Interqration＞→＜InterqrationEvent…＞进行人为峰筛选。(5)设置峰高域和峰面积域进行峰的筛选。(6)退出峰优化。13)打

8、印报告:(1)点击＜Ｒeport＞→＜SpecfyＲeport…＞进行打印格式和内容设置。(2)选择＜Printer＞为直接打印，选择＜Screen＞为显示到屏幕后再打印。选中＜File＞可选择文件存储格式