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时间:2017-12-07
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1、唐茂妍,等:饲用酶制剂活性检测中应注意的问题薹攀霪攀囊美萎墓善萎娄萋蓦妻萎饲用酶制剂活性检测中应注意的问题唐茂妍陈旭东王纪亭(北京华美源生物科技有限公司,北京101118)摘要:本文综述了影响酶制剂活性的因素,以及在实际检测过程中需注意的问题。目的是为酶制剂的检测提供一些可借鉴的经验,从而进一步推动酶制剂在饲料中的广泛应用。关键词:酶制剂;酶活检测TheAttentionQuestioninFeedEnzymeActivityDetectionTangMaoyanChengXudongWangJitingAbstract:Factorsaffectingfeedenzymeactivi
2、tyweresummarizedinthispaper.Questionsinenzymeactivitydeterminationwereemphasizedinordertosupplysomeexperienceinfeedenzymepreparationactivitydetectionandfurtherimprovetheextensiveapplicationinfeed.KeyWords:feedenzyme;activitydetection饲料酶是应用现代生物工程技术,选用特殊酶制剂产品的质量是很困难的。这是因为不同的微生物菌株经发酵产生的具有催化活性的生饲料酶是
3、由不同微生物发酵产生的,并且各种微物制剂。酶制剂对提高饲料转化率、拓宽饲料原生物所产生的酶的最佳pH值、温度和对底物的料的应用范围和比例、降低饲养成本、改善饲养亲和性都不相同。这就限制了相同类型不同微环境等起着无可替代的作用。然而在实际应用生物发酵产品的活性测定方法的标准化。而且,过程中,饲料酶制剂受到如下薄弱环节的制约,为了保证所生产的酶的活性稳定和保障生产者即标准化、公开有效的质量控制体系、良好的热的利益,不同的生产厂家均制定了切合自己利益稳定性、更加准确的液体应用系统、较为明确的的酶活测定方法。大多数用户仅靠酶活作为购技术信息公示,以及使生产性能反应更加一致的买酶制剂的标准,实际
4、上这是很不够的。酶活亦产品(Sheppy,2004)。对于添加剂厂或饲料厂来非越高越好,有研究表明,较高酶活的产品提高说,如何准确检测各种酶制剂产品的活性,提高了酶制剂的生产成本,而且会达不到提高养殖效不同厂家提供的同种产品的可比性,是提高酶制益的目的,这可能与酶产物的负反馈调控有关。剂在动物体内有效性的前提之一,因而本文仅对关于酶活的通用定义是在一定条件下(温饲用酶制剂活性检测中出现的问题做一综述。度、pH值),每分钟内从底物降解释放1p~nol产物众所周知,影响酶活性的因素包括:酶作用所需要的酶量为—个酶活单位;而国内很多生产企底物、作用温度、pH值和作用时间。其中任一条业往往定义
5、为一定条件下(温度、pH值),每分钟件的改变,都会影响最终酶活测定结果。(秒、小时)内降解释放1(mg、nmo1)产物所需的1酶活单位的定义酶量为一个酶活单位。这样以不同定义得出的酶目前评价酶制剂的优劣大都采用单位酶活活相差很大。表1是按不同定义测定的同一样品的高低来表示,但各种酶制剂的酶活单位及测定(木聚糖酶)活性结果。由表1可知,不同定义方法方法并不统一。因而衡量不同酶制剂生产厂家得到的酶活结果之间有显著差异。.-——34.-——中国饲料添加剂2010年第7期(总第97期)2底物类型与浓度87.97%。这表明试验所用木聚糖酶对桦木木聚从生物化学的角度来讲,酶是对于特定底物糖的针对性
6、要高于燕麦木聚糖。具有活性的一种物质。因而,底物类型和浓度均3pH值对酶活测定结果有重要影响。陆文清等(2005)动物消化道的内环境很复杂。仅就pH值研究了底物类型对木聚糖酶活性的影响,发现同对酶活测定结果的影响,不同研究得出的结论差种木聚糖酶分别作用于桦木木聚糖和燕麦木聚异很大。因为在消化道不同部位,其内容物的停糖时,所得的木聚糖酶活性差异很大。也有研究留时间和pH值差异很大(见表2)。各研究者发现分别用桦木木聚糖和燕麦木聚糖为底物时,对酶活测定的pH值选择也莫衷一是,各酶制剂所测定的复合酶制剂中的木聚糖酶以燕麦木聚生产厂家更是各行其是。但现在普遍接受的酶糖为底物时活性只有以桦木木聚
7、糖为底物时的活测定pH值为5.5。表1不同测定方法对酶制剂活性的影响同时,测定某一固定pH值的酶活特性很难4作用温度对酶制剂做出准确评估。因为在养分消化吸收通用标准中规定酶活测定温度一般为之前的各段消化道酶制剂都可发挥作用。小肠37℃,国内酶活定义中测定温度则比较混乱,如段是营养物质消化吸收的主要部位,食糜在小肠表1所示,测定温度为40~5O℃。如何选择酶段的停留时间也较长,如何使酶制剂顺利通过肠活测定时的温度,各研究者的说法也很不一致。道前段
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