生物发酵制氢菌种富集优化与产氢的关联研究

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1、河南化工2010年8月第27卷第8期(下)HENANCHEMICALINDUSTRY生物发酵制氢菌种富集优化与产氢的关联研究计新静,李涛,孙学习,江振西,任保增(1.郑州大学化工与能源学院,河南郑州450001;2.中州大学化工食品学院,河南郑州450044)【摘要】本实验在不同溶液介质中用加热、曝气及二者联合并用的方法处理牛粪,富集厌氧发酵产氢茵。以4.4g蔗糖为底物,用不同方法富集的产氢菌进行厌氧发酵制氢,考察不同方法处理过的菌源的累积产氢量。结果表明在0.25%NaOH溶液中加热处理牛粪的效果最好,再与曝气联合富集优化,能进一步提高产氢量,累积产氢量为1345.5mL

2、,是直接曝气富集菌源产氢量的2.0倍,直接在水溶液加热处理过的1.8倍。而且经过碱加热处理过的菌源,最佳曝气时间缩短至30min,为直接曝气时间的1/4,最佳发酵初始pH值为6.0—7.0。【关键词】生物制氢;厌氧发酵;牛粪;产氢茵【中图分类号】TQ116.29【文献标识码】A【文章编号】1003—3467(2010)16—0031—03能源是人类赖以生存和发展的基础,是人类文取自郑州西郊奶牛养殖基地的牛粪堆肥,蔗糖,明的进步与经济的发展的制约条件。目前,石油、煤营养液。炭和天然气等化石能源是人类主要利用的能源,但营养液组成(g/L):NH4HCO32.0g;KH2PO它们

3、都是非可再生的,而且逐渐枯竭,能利用的时间1.0g;MgS04。7H20100mg;Na2MoO4‘2H2010越来越短⋯。寻求清洁的、可再生的能源是人类面mg;NaC110mg;CaC12·2H2O10mg;MnSO4·7H2O临的一项紧迫任务j。氢能,因其有储运性好、能15mg;FeC1,2.78mg。NaOH,浓盐酸。量值高、清洁及应用范围广等优点,被认为是最具有1.2实验设备及仪器吸引力的替代能源。在诸多的制氢方法中,厌250mL发酵瓶,THZ一82B气浴恒温振荡器,氧发酵制氢由于能解决有机废物污染和能源短缺两6071型微电脑pH计,排水集气装置,FA2104N电个

4、难题j,因而备受关注,并且取得了突破性进子分析天秤,GC9900气相色谱仪。展。厌氧发酵制氢中,菌源的选择非常重要。1.3实验方法纯菌种价格昂贵,且在不断制氢过程中易发生变种,牛粪通过曝气,在不同溶液介质中加热煮沸预甚至被污染,制氢能力会逐渐下降。相比之下,混合处理j。取不同方法预处理过的牛粪上清液菌种发酵制氢更具发展前景。牛粪堆肥易得,通过200mL加入到250mL发酵瓶中,加入20mL营养适当的处理后,可作为天然混合产氢菌源直接用于液,各加4.4g蔗糖;然后通氮气除氧,密封后放入厌氧发酵制氢。但不同的预处理方法对产氢效果有到气浴振荡箱中,37℃±1℃和120r/min条

5、件下重要影响,所以,寻求一种较佳从牛粪中富集产氢菌进行培养,问隔一定时间用自制排水集气装置收集。的预处理方法非常必要。目前,菌源富集的方法主2结果与讨论要有酸、碱处理及加热处理等。本文在这些方法基础上进一步改进预处理方2.1茵源直接曝气处理法,并进行产氢实验,得到了较佳结果。取牛粪500g,加入10L水,搅拌均匀后,用空气压缩机通入空气进行强制曝气,然后加入营养液1实验材料和方法和蔗糖,摇床培养,考察曝气时间对蔗糖产氢效果的1.1实验原料影响,结果如下页图1所示。收稿日期:2010—07—21基金项目:国家重点基础研究发展计划项目(973计划)(2005CB214500,2

6、006CB708407)作者简介:计新静(1985一),男,在读硕士研究生;联系人:任保增,电话:(0371)67781223。河南化工·32·HENANCHEMICALINDUSTRY2010年8月第27卷第8期(下)但随着加热时间的继续延长,产氢量出现了下降的趋势。菌源经过后期分离培养及电镜扫描¨⋯,发现置其与梭菌属细菌相似。而梭菌属细菌能在较恶劣的\环境条件下存活,经过酸、碱及NaNO加热处理,能杀死菌源中的非产氢细菌及产甲烷菌,产氢过程中商{5有利于梭菌属细菌自身繁殖,从而提高产氢量。由此可知,采用碱液对菌源进行处理,能够得到较好产氢效果,加热最佳时间为l4~18m

7、in,最大比产氢率可达245.8mlMg。2.3茵源加热和强制曝气联合处理图1菌源曝气时间对累积产氢量的影响由上述知道,菌源加热的最佳条件是在0.25%由图1可以看出,经过曝气处理后的菌源,对蔗的NaOH溶液中加热煮沸l4~18min。把上述条件糖模拟废水表现出很好的产氢能力。随着曝气时间处理过的菌源,再进行强制曝气处理,考察二者联合的增加,菌源的累积产氢量逐渐增大,从20min时处理后对产氢量的影响,结果如图3所示。的366.5mL上升到120rain时的648.0mL,产氢量提高了76.83%;但随着继续延长时

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