细胞生物学实验教程-中山大学生命科学学院.pdf

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1、12345前言细胞生物学是高校生命科学的主干课程之一，是一门实验性很强的学科。生命科学的许多重大发现与细胞生物学实验技术的不断创新、发展是分不开的。因此，学习和掌握细胞生物学最基本的技术和最新的实验方法，对于从事生命科学研究工作者来说是非常重要和完全必要的。目前，适用于高等院校不同层次使用的细胞生物学实验教材不多。由于细胞生物学已成为重要的前沿生物学科，其发展速度之快可谓日新月异，突飞猛进，异常迅速。各种研究新方法、新技术如雨后春笋层出不穷。各学科之间的相互渗透，相互依存紧密相联。如细胞生物学与

2、分子生物学、分子遗传学等实验技术之间就具有很强的依存性和相融性。细胞生物学实验技术的巨大变化，将推动细胞生物学向着更深的层次发展。我们为了紧跟学科发展的趋势，把握学科前进的方向，适应学科发展的要求，将多年来在教学和科研实践中积累及编写的细胞生物学技术编写成《细胞生物学实验》一书。旨在让学生能掌握细胞生物学研究的基本操作技能和新的实验技术，从细胞生物学的角度分析生物学中的问题，为独立进行研究打下基础。本书是王金发教授主编的《细胞生物学》的配套教材之一。全书共有64个实验，内容较丰富，知识面广，既包

3、括常规的经典实验，又新增了不少与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术，如电穿孔和电融合技术、反转录病毒载体介导的基因转导技术、胚胎干细胞的培养和体外分化技术、流式细胞技术、细胞显微注射、共聚焦显微技术、细胞凋亡检测技术等。这些实验内容新颖、技术先进，可操作性强，对培养学生的动手能力、分析问题和解决问题的能力很有帮助。本书第1～4章由戚康标编写；第5～7章由何炎明编写；第8章由何炎明、张利红编写；第9、12章及附录由刘兵编写，并对全书进行文字编辑和校对；第10、11章由张利红、张为民编写；冯冬茹

4、参加了部分实验的初稿编写工作。本书在编写过程中得到王金发教授的亲自指导和中山大学生命科学院的大力支持，在此表示感谢。由于编者的水平有限，难免出现错误，恳请广大读者给予批评指正。编者2004年3月6内容简介本书是王金发教授主持编写的细胞生物学配套实验教材。全书包括12章共64个实验，内容涵盖了部分经典的细胞学生物学实验，又新增了一些与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术。包括光学显微镜技术、电子显微镜技术、细胞形态结构观察、细胞化学、细胞生理、细胞分裂与染色体畸变、染色体技术与核型分析、细胞组织

5、培养技术、细胞化学成分分离、核酸及蛋白质的、细胞工程技术定位检测，以及流式细胞技术、共聚焦显微技术、细胞凋亡检测技术等。本书可供综合性大学、农林、医学、师范院校本科生和研究生细胞生物学实验课教学使用，也可作为从事相关研究人员的参考用书，由于本书实验内容较多，在使用时可根据自身条件酌情选择。7目录第一章光学显微镜技术实验1普通光学显微镜的构造原理及使用方法实验2特殊显微镜的原理和使用实验3显微摄影技术实验4光学显微标本的制作技术第二章电子显微镜技术实验5透射电子显微镜实验6透射电子显微镜样品制备实

6、验7扫描电子显微镜实验8扫描电子显微镜样品制备第三章细胞的形态结构实验9细胞形态结构与几种细胞器的观察实验10液泡系和线粒体的活体染色实验11植物细胞骨架的光学显微镜观察实验12细胞骨架的免疫荧光显示实验13细胞的超微结构实验14细胞的显微测量第四章细胞化学实验15DNA的细胞化学——Feulgen反应实验16RNA的细胞化学——Brachet反应实验17细胞中多糖和过氧化物酶的定位实验18细胞中酸性磷酸酶的定位实验19细胞中碱性磷酸酶的定位第五章细胞生理实验20小鼠巨噬细胞吞噬的观察实验21胞

7、饮作用实验22细胞膜的通透性实验23细胞电泳第六章细胞分裂与染色体畸变实验24细胞的无丝分裂与有丝分裂实验25细胞减数分裂实验26环境因素及辐射诱变染色体改组的观察第七章染色体技术与核型分析实验27植物染色体标本的制备和观察实验28动物骨髓细胞染色体标本的制备实验29人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备实验30人类染色体G带技术实验31植物染色体分带技术实验32人类体细胞染色体组型分析实验33染色体核仁组织区（NORs）的显示实验34姊妹染色单体色差分析技术第八章细胞和组织培养技术8实验35植

8、物组织培养技术实验36原生质体的分离和培养实验37植物体细胞杂交——原生质体的融合实验38动物细胞原代培养实验39传代细胞培养实验40细胞的冻存与复苏实验41哺乳动物胚胎干细胞的培养和体外分化第九章细胞化学成分的分离实验42细胞核与线粒体的分级分离实验43完整叶绿体的分离实验44中期染色体的分离纯化实验45动物细胞基因组DNA的提取实验46植物基因组DNA的提取实验47细胞和组织总RNA的提取实验48琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段第十章蛋白质、核酸的定位与检测实验49地高辛标记探针的Souther