猪乙型脑炎病毒实验室诊断方法研究进展-论文.pdf

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1、MODERNSWINElNDUSTRY疫病防控与保健_猪乙型脑炎病毒实验室诊断方法研究进展■张文通’魏凤沈志强(1．山东绿都生物科技有限公司，山东滨州256600；2．山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州256600)摘要猪乙型脑炎是引起母猪流产，产弱胎、死胎的重要传染病之一，严重危害养猪业健康发展。正确诊断乙型脑炎病对防制该病极为关键。文章就该病的病原学诊断、血清学诊断、分子生物学诊断5方面展开阐述，探讨该病诊断方面的研究进展。关键词猪乙型脑炎；诊断方法；研究进展AbstractSwineJapaneseencephalitisisoneoftheimportantinfe

2、ctiousdiseaseswhichcouldcauseSOWabortion，weakchild，stillbirthandseriousharmtothehealthydevelopmentofthepigindustry．CorrectdiagnosisswineJapaneseencephalitisisthekeymeasuresofdiseasecontro1．Thispaperdescribedtheetiologicaldiagnosis，serologicaldiagnostics，molecularbiologydiseasediagnosis，tou

3、nderstandadvancesindiagnosisofthedisease．KeywordsswineJapaneseencephalitis；diagnosticmethod；progress中图分类号：$858．28文献标识码：A文章编号：1006—6514(2014)06—0027—03乙型脑炎(JaPanese共患虫媒病毒性疾病。乙脑是危害段的猪感染，感染的猪致死率不高，encephalitis，JE)又称流行性乙型脑养猪业的重大疫病之一，是导致种猪但种猪可出现繁殖障碍，怀孕母猪出炎、日本乙型脑炎，简称乙脑，是由繁殖障碍的元凶之一，主要以母猪流现流产、产死胎或

4、木乃伊胎，仔猪和乙型脑炎病毒(Japaneseencephalitis产、死胎和公猪睾丸炎为特征。猪乙育肥猪出现神经症状，是引起养猪virus，JEV)引起的一种严重的人畜脑病毒可引起不同品种、不同年龄阶业严重经济损失的重大传染性疾病之一。文献表明，我国多地养猪场基金项目：山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队SDAIT一06-01I一14。都存在猪乙型脑炎血清抗体阳性，通讯作者：张文通，助理研究员，主要从事兽用生物制品研究。并且存在种猪、商品猪抗体阳性波收稿日期：2014-4-16。动较大。这说明散养户、规模ModernSwineIndustry27养殖场均有猪乙型脑

5、炎感染。由于是近年来出现的比较新的细胞分行测定。如果病猪恢复期血清比急引起种猪繁殖障碍的疾病较多，因离JEV的方法。具体步骤为：在单性期血清的抗体滴度增长4N以上，此仅靠传统方法诊断猪乙脑病显得层仓鼠肾原代细胞内加入原营养液可诊断为患猪乙脑病毒。单份血清较为困难，实验室诊断显得较为重1／10的接种样品，接种后24～72h抗体滴度1：16以上，应结合临床要。文章就该病实验室诊断方法进出现细胞病变；将病变细胞液继续症状，进行诊断。补体结合试验方行综述，其目的就是向所有从事养接种原代细胞，如果再次出现明显法特异性强、敏感度低，曾经是确猪生产或研究工作者提供一份参考细胞病变，即分离

6、到JEV。鸡胚细胞、认JEV的经典方法。资料。仓鼠肾单层细胞、C6／36、Vero、2．2血凝抑制试验(⋯)BHK-21细胞系也可用于分离病毒，有血凝素的病毒能凝集人或动1病原学诊断接种病料观察约10d，第2d出现细物红细胞的现象称为血凝现象，血在猪群流行的早期和发病的早胞病变，应转移接种新的细胞单层，凝现象被相应抗体抑制称为血凝抑期(即病毒血症阶段)，可无菌采取如果仍出现类似的病变即可收获，制试验。HI试验检测JEV结果判病猪的血液或脑脊髓液分离病毒。各收获的病毒即JEV。定时应注意：患猪恢复期血清的血项操作以及病料的运送，必须遵守“冷从传播媒介蚊虫体内分离凝抑制抗体效价

7、比急性期的血清高藏”和“快运”两个原则。如果病畜JEV，将蚊虫饲养3d，可提高病毒4倍以上，或单份血清作免疫球蛋死亡，则应在死亡后3h内(越早越好)的分离率。蚊虫可用氯仿熏的方法白M(IgM)处理后，血清抗体效价采取脑组织。采集的脑组织置冰箱内致死，其他方法与处理猪乙脑组织比处理前降低2个滴度以上时，均储存、待分离；如果不能立即分离的，一致。可诊断患病猪为猪流行性乙脑病。应置于一25℃～一30~C冰箱或加50％病毒分离方法的优点是准确可由于人和动物感染JEV后，血清中甘油生理盐水保存。靠，但缺点是耗时长、费力、且需