南方红豆杉内生真菌的初步研究-论文.pdf

《南方红豆杉内生真菌的初步研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、．——332．-——江苏农业科学2013年第41卷第9期于淼，杨梅，张连茹．南方红豆杉内生真菌的初步研究[J]．江苏农业科学，2013，41(9)：332—335南方红豆杉内生真菌的初步研究于淼，杨梅，张连茹(1．宁夏大学生命科学学院，宁夏银川750021；2．厦门大学生命科学学院，福建厦门361005)摘要：从共生理论出发，对采自福建省龙岩山区的药用植物南方红豆杉的内生真菌进行分离。从南方红豆杉的树叶、短茎和树皮中共分离得到107株内生真菌。抗菌、抗氧化和抗肿瘤活性检测结果显示，其中有8株菌对1种或者

2、几种指示菌有一定的抗菌活性，占供测菌株的7．48％；有40株菌对HeLa细胞有较强的细胞毒活性，占供测菌株的37。38％；有2株菌对DPPH·有机自由基有较强清除活性，占供测菌株的1．87％。从南方红豆杉内生真菌Xflar／a／essp．的固体发酵产物中初步分离并鉴定出化合物10，11一dihydroxynerolidol，该化合物表现出了一定的抗氧化作用。说明南方红豆杉植物中含有丰富的菌种资源，具有开发生物活性物质的潜力。关键词：南方红豆杉；内生真菌；生物活性中图分类号：Q178．531文献标志码：A

3、文章编号：1002—1302(2013)09—0332一o4微生物与植物有极其密切的关系，其中根瘤菌与豆科植物碱尤其引人瞩目。但由于红豆杉生长缓慢、资源短缺、物、菌根真菌与木本植物的共生关系早已为人们所熟知。植树皮中有效成分含量很少，提取利用受到极大限制，因此，开物内生真菌是指那些在其生活史中的某一段时期生活在植物展红豆杉内生真菌的分离及其代谢产物的研究，将为人类从组织内部而不会引起植物组织产生明显病害症的真菌。微生物角度寻找抗癌药物开辟一条新的途径。1898年Vogl从黑麦草(Loliumtemule

4、ntumL．)种子中分离发1材料与方法现了第1株内生真菌，至今已有．100多年的历史。植物内生真菌普遍存在于各种陆生及水生植物中，具有非常广泛的1．1试验样品宿主多样性。由于植物内生真菌生活环境的多样性和特殊南方红豆衫树皮、短茎、短叶等植物样品于2007年3月性，在其次级代谢产物合成方面具有以下明显特点：不仅能产采自福建省龙岩山区。生一些结构独特、骨架新颖的活性化合物，而且很有可能合成1．2抗茵活性测定用指示茵与其宿主相同或相似的生理活性物质。自1993年Strobel等枯草芽孢杆菌(Bacilluss

5、ubtilis)、短小芽孢杆菌(B．从短叶红豆杉的树皮中分离到1株产紫杉醇的内生真菌——pumilus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球菌安德氏紫杉霉(Taxomycesandreanae)以后，从植物内生菌(Staphalococcusaureus)、藤黄八叠球菌(Sarcinalutea)、白色中寻找和发现新的活性化合物逐渐成为内生菌的研究热点，假丝酵母(Candidaalbicans)，均为宁夏大学生命科学学院实目前从植物内生真菌中得到的次生代谢产物包括抗生素、抗验室保存

6、菌种。肿瘤和抗氧化等多种活性化合物。1．3肿瘤细胞株红豆杉科红豆杉属(Taxus)植物为第3纪孓遗植物，在地人宫颈癌HeLa细胞，购于中科院上海细胞所。球上已生存繁衍了250万年。2O世纪70年代，Wani等从1．4常用的培养基短叶红豆杉(brevifolia)提取分离得到的天然抗癌化合物紫细胞培养基(DMEM)：10g干粉DMEM溶于1L双蒸水杉醇，具有独特的抑制微管解聚和稳定微管作用，对卵巢癌、中，加入3．17gNaHCO搅拌均匀，溶解后加10％～15％已灭乳腺癌、肺癌、食道癌、前列腺癌以及直肠癌均

7、有疗效。自活(56℃温浴30rain)的小牛血清及1％三抗，混匀后用1992年12月29日美国FDA正式批准上市后，它立即成为全0．22vm孔径的无菌滤膜过滤除菌。球最畅销的抗癌明星药物，保持着20％左右的年增长率⋯，马铃薯葡萄糖培养基(PDA)：马铃薯200g(去皮，切成是最近40余年来全世界发现的最重要的抗肿瘤药物之一。小块，加水煮沸30min，4～6层纱布过滤，收集滤液)，葡萄糖红豆杉属植物的药用价值引起了世界性的研究机构和制20g，用水定容至1000mL，固体培养基则加入1．5％一2％的药企业的

8、高度重视。研究、开发和利用这一抗肿瘤药用植物琼脂，121高压灭菌20rain。资源的活动在世界范围内普遍展开。从红豆杉属植物中分离水琼脂培养基：水中加入1．5％～2％的琼脂，121℃高压得到的200多种成分中，抗癌活性较强的紫杉烷类二萜及生灭菌20min。1．5内生真菌的分离2007年3月于福建省龙岩山区采集百年南方红豆杉植收稿日期：2013一O3—21作者简介：于淼(1984一)，男，宁夏银川人，硕士，实验师，从事天然物的树叶、短枝、树皮