牛肉膏蛋白胨培养基的制备.doc

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1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备一、目的要求（1）明确培养基的配制原理。（2）通过对培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛和最普通的细菌基础培养基，又称普通培养基。它含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，可供微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCI。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCI提提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量的琼脂作为凝固剂。由于这种培养基多用于培养细菌，因此要

2、用稀酸或稀碱将其PH调至碱性，以利于细菌的生长繁殖。牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏3.0gNaCI5.og蛋白胨10.0g水1000mlpH7.4～7.6三、操作器材（1）溶液与试剂牛肉膏，蛋白胨，NaCI,琼脂，1mol/LNaOH,1mol/LHCI。（2）仪器及其他用具试管，锥形瓶，烧杯，量筒，玻璃棒培养基分装器，，天平，高压蒸汽灭菌器，PH试纸，棉花，牛皮纸，麻绳，纱布等。四、操作步骤1、称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCI放入烧杯中。2、融化在上述烧杯中先加入少于所

3、需要的水量，用玻璃棒搅匀。然后加热使其溶解。各试剂完全溶解后，补充水到所需的总体积。配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。3、调pH用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌，并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之，用1mol/LHCI进行调节。4、分装和加塞将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。5、包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号

4、笔注明培养基名称、组别、配制日期。6、灭菌将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。7、搁置斜面将灭菌的试管培养基冷却至500C左右，将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当，使斜面的长度约为管长1/3。8、无菌检查将灭菌培养基放入370C的培养箱中培养24～28h，以检查灭菌是否彻底。高氏一号培养基的制备一、目的要求1、了解高氏一号培养基的特点、作用。2、熟练掌握配制