蚕豆花左旋多巴液相色谱检测方法的建立-论文.pdf

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1、江苏农业学报(JiangsuofAgr．Sci．)，2012，28(3)：688～690郑开斌，李爱萍，曹奕鸯，等．蚕豆花左旋多巴液相色谱检测方法的建立[J]．江苏农业学报，2012，28(3)：688-690蚕豆花左旋多巴液相色谱检测方法的建立郑开斌，李爱萍，曹奕鸯，郑金贵(1．福建农林大学，福建福州350002；2．福建省农业科学院作物研究所，福建福州350013；3．三明市农业科学研究所，福建沙县365509)关键词：蚕豆花；左旋多巴；高效液相色谱中图分类号：0657．72文献标识码：A文章编号：1000A．A．A,9(2012)

2、03-0688-03Developmentofhighperformanceliquidchromatographyfordetermina-tionofL—DopafromViciafabaflowerZHENGKai-bin'，LIAi．ping，CAOYiyang。，ZHENGJin．gui(1．FufianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou350002，China；2．InstituteofCropSciences，FujianAcademyofAgriculturalSciences

3、，Fuzhou350013，China；3．SanmingInstituteofAgriculturalSciences，Shaxian365509，China)Keywords：Vicia知baflower；L-Dopa；highperformaneeliquidchromatography(HPLC)蚕豆(ViciafabaL．)是豆科一年生草本植物。蚕豆中含(HAc)、甲酸为GR级，盐酸、磷酸为AR级，试剂均由国药集有左旋多巴(L—Dopa)成分。J，它是人和动物体内合成去甲团化学试剂有限公司生产；L—Dopa标准品购自中国药品生

4、肾上腺素和多巴胺的前体之一，是经典的抗震颤麻痹药，临物制品检定所；蚕豆花采自福建省农业科学院作物研究所福床上用于帕金森氏病的治疗。Rocco等研究认为，蚕州试验基地。豆不同器官L—Dopa含量不同，开花前整株L—Dopa含量1．2HPLC色谱条件的确立0．24％，叶片L—Dopa含量0．36％，茎中L—Dopa含量0．17％，1．2．1标准品的制备精密称取L—Dopa标准品10mg置根中L—Dopa含量0．35％。蚕豆花的L—Dopa含量未见报道。于10ml容量瓶中，用0．1mol／LHAc溶液溶解，定容至刻为了更准确地测定蚕豆花左旋多

5、巴的含量，通过比较不同色度，摇匀，使之成为浓度为1000mg／L的标准贮备液，备用。谱柱、不同流动相对蚕豆花样品中左旋多巴的分离效果，建1．2．2供试品溶液的制备蚕豆(品种陵西一寸)样品经立测定蚕豆花左旋多巴含量的高效液相色谱法(HPLC)。40℃干燥48h后，用粉碎机粉碎成细粉，过200目筛。精密1材料与方法称取粉末0．O1g，置于10ml刻度试管中，加入0．1mol／LHAc溶液5ml，超声波处理30min，过滤。取滤液1．0ml加1．1仪器及试剂至10ml容量瓶中，用0．1mol／LHAc溶液定容至刻度，即得主要仪器有Agilen

6、tl200系列液相色谱仪、SHZ—D(Ⅲ)供试品溶液。循环水式真空泵、电热恒温鼓风干燥箱、TP-214电子天平和1．2．3检测波长的确定对L—Dopa进行全波长扫描，根据SB-5200DTDN数控超声波清洗器。0．45LLm微孔滤膜为上L—Dopa的最大吸收峰确定检测波长。海兴亚净化材料厂产品。乙腈、甲醇为HPLC级，乙酸1．2．4色谱柱的选择在波长280rim、流速1ml／min、柱温30℃、进样量20条件下，采用十八烷基硅烷键合硅胶柱，收稿日期：2011-03-28即ODS柱(4．6mmx150．0mm，5m)，设置6种不同的流动基

7、金项目：福建省属公益类科研专项(2011R1028~)相组合，观察标准品和蚕豆花样品中L—Dopa出峰时间和峰作者简介：郑开斌(1966-)，男，福建仙游人，博士研究生，研究员。研究方向：作物品质育种与农产品天然产物。型。6种流动相组合分别为CHOH：0．1mol／LHAc=5：通讯作者：郑金贵，(E-mail)jgzheng@fjau．edu．cn95、CH3OH：0．1mol／LHAc=10：90、CH3OH：0．1mol／L郑开斌等：蚕豆花左旋多巴液相色谱检测方法的建立HAc=20：80、CH3OH：0．05mol／LHAe=5：

8、95、cOH：豆花样品0．01g共6份，置于10m1刻度试管中，再分别用0．01mol／LK2HPO4=5：95和CH3OH：0．01mol／L移液管精确移入标准品储备液，分别加入提取液并定容至K2HPO4