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1、·10·林产化工通讯2005年第39卷第3期爬山虎果实红色素的提取及其抗氧化能力的研究*赵虹桥,董爱文,王明坤*(吉首大学农林系,湖南张家界427000)摘要:研究了爬山虎果实红色素的提取方法、最佳提取条件及抗氧化能力,结果表明:最佳提取方法为水提法,最佳提取条件为温度50℃、时间2h、料液比1:4、溶剂为3%碱液。其红色素的抗氧化能力为53%。关键词:爬山虎;红色素;提取;抗氧化能力中图分类号:TQ91文献标识码:A文章编号:1005-3433(2005)03-0010-04葡萄科爬山虎(Parthenocissustricu
2、spi-1.2.1提取工艺色素的提取工艺过程如chatePlach.)又名地棉、爬墙虎,属多年生落下:爬山虎果实’洗净’去籽’研碎’不同叶藤本植物,其根、茎可入药,能破淤血、消肿方法处理’浸提’纯化’过滤’干燥’密封[1]毒。成熟果实为球形浆果,黑褐色。本文处理。作者研究了爬山虎果实红色素的最佳提取方1.2.2提取方法的比较称取爬山虎果实法、最佳提取条件及其抗氧化性能力。为爬10g若干份,洗净、去籽、研碎,加入30mL山虎果实红色素的开发和利用提供参考。蒸馏水,于室温下静置浸提2h,过滤,滤渣1实验部分中加入20mL蒸馏水再静置
3、浸提一次,合并1.1材料、仪器和试剂滤液定容至100mL。爬山虎果实于2003年11月采集于吉首在上述提取条件下采取如下3种方法分大学张家界校区校园内,采集后洗净,封于食别于静置浸提前进行处理:1)室温下不加其品袋中,置于超低温冰柜中待用。它条件;2)微波火力100(中档)下分3次处仪器包括MAF-9A低温冰柜(日本产、理30s;3)超声波在火力100(中档)下处理三洋),UV-160型紫外可见光度计(日本产、30s。以提取剂为参比液、同波长的条件下岛津),AEG-220电子天平(日本产、岛津),测定吸光值,以吸光值的大小比较3
4、种方法DP-32真空干燥箱(日本产),RE-540旋转蒸提取红色素的得率,结果见表1。发仪(日本产)。1.2.3最佳提取条件的选择按温度、时乙醚、二苯代苦味酰自由基(DPPH)、间、料液比、溶剂品种4因素4水平设计正交Vc、乙醇、乙酸乙酯、盐酸、氢氧化钠等试剂试验表,以色素吸光值的大小为考核色素提均为国产分析纯。取得率的指标,考察最佳提取条件。正交试1.2色素的提取验及测定结果见表2,方差分析结果见表3。*作者简介:赵虹桥(1972-),男(土家族),湖南张家界,实验师,硕士生,研究方向为植物活性物质的提取与利用。*吉首大学20
5、00级生物科学专业毕业学生。林产化工通讯2005年第39卷第3期·11·1.2.4色素的提取称取爬山虎果实mL浓度为0.2mmol/L的DPPH溶剂混合100g,按1.2.3节得到的最佳提取方法和最均匀后,以溶剂为参比,用分光光度计测定上佳提取条件提取爬山虎色素。述溶液在波长517nm处的ABS值(即A)。j1.3色素的纯化1.4.4DPPH溶液ABS值的测定精确吸色素的纯化分别采取以下3个步骤取0.2mmol/L的DPPH溶液和水各2mL,进行。均匀混合后,以溶剂为参比,用分光光度计分1.3.1两相萃取法利用色素与杂质在两别测
6、定该溶液在波长517nm处的ABS值相溶剂中分配系数的不同加以分离。爬山虎(即Ac)。[2]果实红色素属于黄酮类色素,将爬山虎色2结果与讨论素溶液放入乙酸乙酯-水两相萃取液中静置2.1提取方法的选择15min,爬山虎色素液溶入水中,而其中的弱以提取剂为参比在紫外/可见光度计下极性杂质溶入乙酸乙酯。分液,取下层液体。测定200~800nm间的全波扫描,选择最大重复上述过程3次。吸收波长为410nm,并测定各种方法提取的1.3.2沉淀析出法在室温下量取上述萃提取液的最大吸光值,以吸光值A值为对比取后的色素溶液,在溶液中加入3~5倍的
7、乙得出最佳提取方法,其结果见表1。醚,充分震荡后,静置于冰箱中,色素以沉淀表1各提取法所提取爬山虎析出。将此沉淀用0.1%盐酸化甲醇溶解,色素溶液的吸光值抽滤,滤液中加入3~5倍的乙醚,冰箱中静试验号123平均置,色素以沉淀析出,得较纯的色素。最水提法2.3792.3382.4352.384后将沉淀色素置于40℃下真空干燥微波法2.3832.4402.3312.385超声波法2.4792.2812.3202.360(9332.54Pa),得紫红色粉末状色素。1.3.3薄板层析法将上述色素进行薄板由表1可知,本实验条件下,用微波法
8、提层析分离纯化。薄层板采用硅胶H,展开剂取爬山虎红色素得率最高,其次为水提法,而用水:乙醇:正丁醇:乙酸乙酯按体积比8:20超声波法最低,微波法和水提法相比差别不是很大,考虑到工业生产成本,确定水提法为:16:36配制。最佳提取方法。1.4爬山虎果实红色素抗氧化