斑马鱼LD50鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告.pdf

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1、鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告一、实验目的与实验要求1、通过本实验,熟悉和掌握急性毒性试验的设计、条件、操作步骤,以及试验结果的计算、分析和报告等全过程。2、掌握常用的动物染毒途径和方法。掌握急性毒性实验设计,操作方法,结果判定。3、了解一次或24小时内多次给予受试化学物后,动物所产生的急性毒性反应及其严重程度,中毒死亡的特征以及可能的死亡原因,观察受试物毒性反应与剂量的关系,求出半数致死量。能较熟练地计算出LC50及毒性判定。4、对比观察毒物对斑马鱼的作用。5、体验开放式实验教学,培养生物实验意识,提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰

2、写实验报告水平。二、实验方案1、实验仪器天平、手套、50mL烧杯、量筒、培养皿、鱼缸、曝气装置2、实验药品斑马鱼100条、重铬酸钾、鱼食3、实验原理(1)方法的设置鱼类毒性实验方法可以分为静态法和动态法两大类。本实验采用静态法,以96小时为一试验周期,在24、48、72、96小时记录斑马鱼的死亡率,确定斑马鱼死亡50%时的受试物浓度。半数致死浓度用24hLC50、48hLC50、72hLC50和96hLC50表示,并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。(2)受试药物受试毒物要为常见毒物,并在水体中会存在,对鱼类养殖的影响较为严重。另外

3、受试毒物在水中应要稳定,不易分解,易溶解等。1(3)受试鱼类实验鱼类一般选择对污染物敏感,在生态类群中具有代表性,经济价值比较高,来源丰富、取材方便、遗传稳定,生物学背景资料丰富,大小适中,在室内条件下易于饲养和繁殖的种类。斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种。建议的实验温度21-25℃,建议实验鱼的全长2.0∓1cm。(4)研究意义鱼类是水生食物链的顶级生物,也是水体中最为重要的经济动物。在污染水体中,当污染物达到一定浓度时,就会引起鱼类各种中毒反应,例如行为失常,组织器官病变,生理功能紊乱乃至死亡。在人为控制条件下,进行各种鱼类毒性实验,不仅用

4、于化学品毒性强度测定、水体污染程度、废水及其处理效果检查,而且也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供科学依据。因此,开展鱼类急性毒性实验的研究,对实验结果给出正确合理的评价,对于我国水资源保护具有重要意义。4、实验步骤(1)预实验正式实验前必须对实验用鱼进行驯养,然后根据预实验得出的结果(以上部分内容可另行安排实验时间),在包括使鱼全部死亡的最低浓度和96h鱼类全部存活的最高浓度之间至少应设置5个浓度组。每个实验浓度组应至少设3个平行系列,每一系列设一个空白对照。(2)正式试验浓度系列:每组分别取0,50,100,150mg/L重铬酸钾加入鱼

5、缸水中,充分混匀。在实验开始后3h或6h观察各处理组鱼的状况,并记录实验鱼的异常行为〈如鱼体侧翻、失去平衡,游泳能力和呼吸功能减弱,色素沉积等〉。至少在24h、48h、72h和96h后检查受试鱼的状况,并做记录。如果受试鱼没有任何肉眼可见的运动,如鳃的扇动、碰触尾柄后无反2应,即可判断该鱼已死亡。观察并记录死鱼数目后,将死鱼从容器中取出。三、实验结果与数据处理1、斑马鱼数据记录情况表1斑马鱼时间-存活条数浓度时间/h02448729612604444441044333340444444704444441004433331504444422、数据处理结果

6、(直线内插法)表2斑马鱼死亡率-浓度关系浓度时间/h0244872961260000000100025252525400000007000000010000252525251500000050图124LC50图248LC50任取72小时数据分析误差25-0/25=100%,任选100mg/L浓度分析误差24-48小时25-0=25,其他小时25-25=0四、实验结论1、数据评价a.由表格记录数据仅126小时150mg/L浓度死亡率为50%其他数据作图不能够得出LC50。3b.由误差分析可以得到数据误差率为100%,因而可以认为鱼类死亡为偶然因数或者因饥

7、饿死亡,数据不具参考价值。c.由预实验和相关文献分析得到斑马鱼的24小时半致死浓度为350mg/L,大于所设的150mg/L的范围。d.有上述实验结果对照《化学物质对鱼类急性毒性危害分级标准》150mg/L对斑马鱼为低毒。2、原因分析a.所设浓度不在范围之内,故现象不明显。b.实验之前鱼类没有养殖好,存在饥饿等不适应因素。c.药品被水里有机物影响。五、实验心得体会1.实验用水使用高质量的自然水或标准稀释水(见本节附录),也可以使用饮用水(必要时应除氯)。2.溶解氧不低于空气饱和值的60%。曝气时不能使受试物明显受损。3.预实验不够准确,故没有很好的得到

8、实验数据,因而需要预习充分。4

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