逆相层析移动相调和酸、盐,防止拖尾图峰说明.pdf

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1、逆相层析移动相调和酸、盐，防止拖尾图峰说明商用RPC18Column，大部份都有针对残存-Si-OH(SilanolGroup)作妥善的终结处理(EndCapping)，另有称谓是BaseDeactivatedPhase。由于各家厂牌终结处理方式的不同，仍有或多或少-Si-OH的残存。RPC18Column，具非极性十八硅烷(-Si-C18H37)与分析物进行“分配”Partition作用，分析物依极性差异性，比较极性物先将被溶洗出，而非极分析则延后被溶洗出，即极性物先于非极性物的分离顺序。若是前述-Si-OH仍有相当

2、的残存，该-Si-OH提供了-SiO-离子交换基，加上原Silica仍有些微重金属，例如：Na+…形成-SiO-Na+更促进-SiO-交换作用力。参照右图，如此，-SiO-极性官能基的呈现，是与非极性-C18官能基，有所矛盾，因此卓越优秀的RPC18Column，必须是甚少残存的硅醇基(SilanolGroup)。残存-Si-OH的具酸-SiO-，它非常容易与有机氨碱物(R-N+)的作用，这也就是容易造成该有机氨碱物的“拖尾”图峰(Tailingpeak)。为了防止此类拖尾图峰的形成，除了妥当选购卓越终结处理的RPLC

3、C18Column之外，参照下图。可按以下的方式试之：1.)移动相调酸*调和1%醋酸，适用至220nm波长*调和0.1%三氟醋酸，适用至210nm波长*调和0.1%磷酸，适用至200nm波长当移动相调和了“酸”≦pH3.0时，它防止Silanol的解离，仍然维持-Si-OH原型，就不再对有机氨碱物有吸附作用，也不致于形成拖尾图峰。就分析物而言如果是有机的酸R-COOH于调酸移动相时，保持R-COOH更非解离性，则更作用滞留于C18(ODS)官能基。反之，如果是有机的氨碱R-NH2，于调酸移动相时，促进R-NH2成为更解

4、离性，即极性型R-NH3+，则降低与C18官能基的作用，而减少滞留。2.)移动相调和20mM~100mM的醋酸盐或磷酸盐，适当调和pH值，以防止-SiO-基的呈现。3.)移动相试调和5mM~10mMTEA(Triethylamine)，它将优先与-SiO-基作用，具终结该Silanolgroup的活性的效应，而促使分析物成无拖尾而尖锐图峰。参照图(三)范例：层析管柱：INERTSIL5umODS-34.6×250mm移动相：Methanol/H2O=90/10侦检器：UV235nm流速：1.0ml/min样品：Econ

5、azdeNitrate,IsoconazoleNitrate