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1、中国给水排水2003Vol.19CHINAWATER&WASTEWATERNo.9二氧化氯对乙肝表面抗原的灭活效果123王丽,黄君礼,孙荣芳(1.深圳市水务局水质检测中心,广东深圳518001;2.哈尔滨工业大学市政环境工程学院,黑龙江哈尔滨150090;3.黑龙江省卫生防疫站病毒所,黑龙江哈尔滨150060)摘要:应用酶联免疫吸附(ELISA)试验研究了二氧化氯(ClO2)在各种条件下对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的灭活效果,并与液氯进行了对比。结果表明,在投量为25mgPL、作用时间为20min、pH值为3.0~7.0时ClO2对HBsAg有很好的灭活效果。与Cl2(液态)相
2、比,ClO2对HB2sAg的灭活效果好、速率快,且pH值适应范围广。关键词:ClO2;液氯;酶联免疫吸附(ELISA);乙肝表面抗原(HBsAg)中图分类号:TU991.2文献标识码:C文章编号:1000-4602(2003)09-0043-021材料与方法考察了ClO2与Cl2于不同试验条件下对HB2111试剂与仪器sAg的灭活效果。二氧化氯(ClO2)与液氯(Cl2)水溶液,自制,纯211不同投量度均达98%以上。取HBsAg使用液50μL,加入不同投量的消毒HBsAg溶液:将HBsAg强阳性血清经饱和硫剂,反应20min后的测定结果见表1。酸铵沉淀、超速离心纯化后制成标准品,
3、保存于-20表1不同投量下ClO2和Cl2对HBsAg的灭活效果℃低温冰箱中。使用时用5%小牛血清稀释为20消毒剂投量(mgPL)吸光度灭活率(%)结论ngPL的使用液。0.50.90946.7(+)2.50.70958.4(+)ELISA检测HBsAg试剂盒:黑龙江省华怡生物5.00.59465.2(+)技术有限公司生产(批号:981205)。7.50.57166.5(+)SLT—酶标仪:日本岛津生产。10.00.49071.3(+)ClO2112研究方法12.50.41875.5(+)15.00.36878.4(+)采用酶联免疫吸附法(ELISA)。通过测定吸光20.00.32
4、281.8(+)度值A来反映HBsAg的灭活情况。以HBsAg使25.00.04797.3(-)用液作为阳性对照,以HBsAg试剂盒中的阴性对照30.00.04997.1(-)作为阴性对照。若A样品≥A阴性对照×2.1则其结果0.51.38119.1(+)2.51.28624.6(+)为HBsAg阳性,反之则为HBsAg阴性。5.01.10135.5(+)取50μLHBsAg抗原使用液,加入50μL消毒7.50.91946.1(+)剂,在避光、室温条件下反应20min后立即用饱和10.00.88448.2(+)Cl2Na2S2O3溶液中止反应。用ELISA方法进行检测,12.50.
5、81552.2(+)15.00.59865.0(+)在450nm波长下测定包被板各孔的吸光度值,并20.00.58965.5(+)计算灭活率:25.00.55667.4(+)A阳性对照-A样品30.00.46872.6(+)灭活率(%)=×100%A阳性对照注:阳性对照为1.706;阴性对照为0.05;(+)表示HBsAg阳性;(-)表示HBsAg阴性。2结果与讨论·43·2003Vol.19中国给水排水No.9由表1可见,随着ClO2和Cl2浓度的增加,吸表3不同反应时间下ClO2和Cl2对HBsAg的灭活效果光度值逐渐减少,对HBsAg的灭活率逐渐增加。对消毒剂时间(min)吸
6、光度灭活率(%)结论于ClO2而言,当浓度≥25mgPL时灭活率可达97%100.24185.9(+)200.04797.3(-)以上,HBsAg呈阴性。反应的剂量方程为:y=-ClO23037.04x+474.61(r=0.970,y为吸光度值,x为投60量),表明随ClO2投量的增加则HBsAg灭活率逐渐10增加,二者之间具有高度相关性。200.55667.4(+)Cl2对于Cl2而言,当投量为25mgPL时灭活率仅300.53768.5(+)600.50970.1(+)为67.4%,投量为30mgPL时也仅为72.6%,在试随着反应时间的增加,ClO2和Cl2对HBsAg的验
7、的剂量下其结果均为HBsAg阳性。反应的剂量灭活率逐渐增加。在投量为25mgPL、作用时间为方程为:y=-33.66x+431.66(r=0.967),Cl2投20min时,ClO2对HBsAg的灭活率就可达97.3%,量与HBsAg灭活效果呈相关关系。由此可见,ClO2HBsAg呈阴性。而在Cl2投量为25.0mgPL、消毒对HBsAg的灭活效果要远远好于Cl2,在相同剂量时间为20min时灭活率仅为67.4%,作用60min下ClO2对HBsAg的灭活率远大于Cl