猪增生性肠炎模型的建立及其病理学研究.pdf

《猪增生性肠炎模型的建立及其病理学研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、HeilongjiangAnimalScience80andVeterinaryMedicine№82009猪增生性肠炎溪罂的建立&其扁理掌研究韦英益，肖爱欢，谢丽华，杨乃欢，黄伟坚，王进声。(1．广西大学动物科学与技术学院，广西南宁530005；2．南京农业大学动物医学院，江苏南京210095；3．广西中医学院，广西南宁530023)中图分类号：$858．28文献标识码：B文章编号：1004—7034(2009)08—0080—03关键词：猪增生性肠炎；胞内劳森茵；病理学摘要：为了复制猪增生性肠炎病的模型并进行病理学观察，试验将临

2、床检测胞内劳森茵为阴性的6～7周龄非免疫健康仔猪6头随机分为攻毒组(4头)与对照组(2头)，攻毒组口服接种猪源胞内劳森菌GX．NN株30mIJ头·次，对照组口服接种无菌稀释液30mL／头·次。感染后分别于21天和56天剖杀感染组仔猪2头和对照组仔猪1头，观察病理变化并采集病变组织器官。结果表明：感染猪临床上出现短暂的体温升高、轻度腹泻等症状，粪便中检出胞内劳森茵。剖检可见腹股沟淋巴结及肠系膜淋巴结呈灰白色肿胀，肠系膜小血管扩张、充血；回肠黏膜褶皱呈脑回状；肝脏出现局部轻度淤血。组织病理学主要表现为猪回肠、结肠集合淋巴小结增多、增大，

3、腺窝内杯状细胞消失，部分腺窝不成熟的上皮细胞增生，腺窝之间的周围组织有嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润；肝脏的窦状隙有局灶性出血，其他组织器官病变不明显。经过免疫组化和原位杂交试验可见回肠、结肠的腺窝内和腺上皮细胞的胞浆内有染成棕黄色或蓝紫色的茵体。猪增生性肠炎(porcineproliferativeenteritis，PPE)内劳森菌阴性)随机分为攻毒组(4只)和对照组是由胞内劳森菌(LawsoniaIntracellularis，LI)引起的猪(2只)，攻毒组投服阳性病料猪回肠黏膜匀浆液的一种接触陛传染病，以回肠及盲结处近端的结肠、

4、盲10mL／只·次，早晚各1次，共2次。记录临床表现和肠高度增生为特征，临床上主要表现为四大类型，即猪临床粪便检查结果，病变组织的病原鉴定后命名为猪肠腺瘤病、局限性回肠炎、增生性出血性肠炎、坏死性源胞内劳森菌GXNN株(另文发表)。肠炎。试验的目的是通过建立猪胞内劳森菌人工感染将6—7周龄非免疫健康猪6头随机分为试验组的试验模型，系统地观察由胞内劳森菌引起的猪增生4头，对照组2头，隔离饲养。试验前1周及当天采集性肠炎病的病理学变化特点，并对病原进行定位，旨在的粪便经PCR检测为胞内劳森菌阴性。试验组经口为进一步研究该病的发病机理和制

5、订科学的防治措施投服猪源性胞内劳森菌阳性的家兔病变回结肠黏膜匀提供参考。浆液30mL／头·次，早晚各1次，共2次；对照组口服1材料与方法生理盐水30mL／头·次，早晚各1次，共2次。每日测1．1材料体温和观察临床症状以及定期采集粪便进行检测，攻经PCR检测为猪增生性肠炎阳性的回结肠病料，毒组和对照组于感染后21天和56天分别剖杀2头和采自南宁某肉联屠宰场；6～7周龄非免疫健康仔猪1头猪。6头，由广西生物制品厂实验猪场提供；家兔，购自广1．3组织病理切片的制作及观察西中医学院实验动物中心；原位杂交试剂盒[原位杂交采集心脏、肝脏、脾脏、

6、肺脏、肾脏、各部位淋巴结、探针参考GenBank序列针对16SrRNA设计(登录号为扁桃体和肠道各段等新鲜组织放人10％中性缓冲甲AM180252)，由上海捷瑞生物公司合成]，购自天津市醛液中固定，常规石蜡包埋，切片(4～5)，H．E．染灏洋生物制品科技有限公司。色，镜检。1．2动物模型的建立1．4免疫组化切片的制作及观察健康家兔6只(试验前采集粪便，经PCR鉴定胞采集猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结、扁桃体和各段肠道等新鲜组织，放入10％中性缓冲甲醛液中固定，石蜡切片，脱蜡、水化；PBS洗2—3次，每次收稿日期：2009—0

7、3—19；修回日期：2009—06—29基金项目：广西科学研究与技术开发项目(桂科攻0537008—3)5min；3％H202滴加在切片上，室温静置10min；PBS作者简介：韦英益(1973一)，女，讲师，博士研究生．洗2—3次，每次5rain；每张切片加1滴或5O的正通讯作者：黄伟坚(1963一)，男(壮族)，教授，博士．常山羊血清封闭液，室温作用20min；甩去多余液体，HeilongjiangAnimalScience82andVeterinaryMedicine№82009甚至消失，固有层内淋巴滤泡增生，深染的细胞明显增多

8、，腺窝周围见有多量的嗜酸性细胞和淋巴细胞浸润，与沈萍等对临床自然感染病例进行病理学观察的结果一相一致，表明成功复制出猪增生性肠炎病例模型。前人的研究结果中，回肠隐窝杯状细胞减少以及黏膜固图4试验组猪回肠腺窝内以及腺上皮细胞顶端出现有层