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《野菊花抑菌和抗病毒作用实验研究_任爱农.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、药物生物技术PharmaceuticalBiotechnology19996(4):241～244241野菊花抑菌和抗病毒作用实验研究1任爱农王志刚卢振初王礼文吴亦伦1(江苏省中医药研究院,南京210028;安徽省医学科学研究所,合肥230061)摘要对野菊花水提物与挥发油的抑菌和抗病毒活性实验研究结果表明,二者均具抑菌和抗病毒活性。对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、福氏志贺菌的抑制作用及抗病毒活性,水提物强于挥发油,而对肺炎链球菌,则相反。关键词野菊花;抑菌;抗病毒中药材野菊花临床上功用主治为:清热解取阴干的头状花序,用水蒸气馏法提取毒,主治痈肿、疔疮、目赤、痢疾、湿疹、温热头痛挥
2、发油,经硫酸钠脱水,得蓝绿色挥发油(每[1]等,其水提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、ml挥发油含生药材300g)。再取其去油后的[2]绿脓杆菌有抑制作用,但挥发油的抑菌试验野菊花加水煎煮,滤取煎煮液,浓缩至适当浓及抗病毒试验未见报道。我们分别对野菊花的度,真空干燥,得水提物干膏(每克干膏含生挥发性成分和水提物同时进行了抑菌和抗病毒药5g)。临用前挥发油和干膏加水配制成所实验研究,为临床用药提供依据。需浓度。2.2抑菌试验1材料2.2.1琼脂打洞扩散法将肺炎链球菌1051.1原药材鉴定(10个/ml),大肠埃希菌(10个/ml),福氏55野菊花采集于南京老山,经南京中医药志贺菌(10个/ml),
3、绿脓假单胞菌(10个/5大学刘训红副教授鉴定为野菊Chysanthe-ml)和金黄色葡萄球菌(10个/ml),分别涂mumindicumL.的头状花序。布于厚约6mm的药皿平板上,然后在其中1.2细菌打成直径约6mm的孔若干,加满野菊花水提肺炎链球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球物(1.16g干膏/ml)和野菊花挥发油,37℃菌、绿脓假单胞菌及福氏志贺菌由江苏省中培养24h,观察抑菌圈大小。医院检验科提供。2.2.2琼脂扩散法在血平板上加入野菊1.3病毒、细胞花水提物及挥发油,取水提物干膏加水溶流行性感冒病毒A3/汉防/359/95(H3N2),解,使水提物(以干膏重量克计)浓度分别为狗肾传代细胞
4、(MDCK)引自国家流感中心。0.2g/ml,0.1g/ml,0.05g/ml,0.025g/ml,1.4药品0.0125g/ml。再取挥发油加水稀释,加适量病毒唑注射液,由上海禾丰制药有限公乳化剂,用剪切乳化机高速搅拌得到均匀的司(0.1g/ml)生产。乳化液,其浓度(以含油量ml计)分别为5%,2.5%,1.25%,0.625%,0.325%,2方法0.156%。然后在血平板上点种肺炎链球菌1052.1野菊花水提物和挥发油的制备(10/ml),大肠埃希菌(10个/ml),福氏志收稿日期:1999-10-06242药物生物技术第6卷第4期55贺菌(10个/ml),绿脓假单胞菌(10个/ml)
5、孔,35℃,5%CO2培养3d,观察CPE,找出药5和金黄色葡萄球菌(10个/ml)。37℃培养物最大无毒浓度(TCD0)。24h分别观察野菊花水提物和挥发油的抑制2.3.3抗病毒实验MDCK细胞96孔培-3生长的最低药物浓度MIC。养板,加入10TCID50病毒液(病毒液作102.3抗病毒试验稀释),35℃,5%CO2吸附2h,弃去病毒液,2.3.1病毒毒力测定MDCK细胞96孔加入最大无毒浓度药液2倍系列稀释液各6板,用无血清培养液洗两次,加入病毒10倍个浓度,每一稀释度3孔,培养3d,观察系例稀释液,每稀释度接种4孔、35℃、5%CPE,测定药物对CPE的抑制。同时设病毒CO2中吸附2h
6、后弃去病毒液,换入维持液对照(不加药液),细胞对照(不加病毒),药物(不含牛血清、含2μg/ml胰酶)继续培养3d,对照(细胞不加病毒,加以不同浓度药液)。观察细胞病变情况(CPE),测定该病毒半数3结果感染量(TCID50)。2.3.2药物对细胞毒性测定MDCK细胞3.1抑菌试验96孔板,加入2倍系列稀释药液(水提物3.1.1琼脂打洞扩散法琼脂打洞扩散法0.4g/ml,挥发油)各7个浓度,每稀释度4抑菌试验结果见表1。Tab1BacteriostaticresultbyagarpunchdiffusionDiameterofbacteriostaticcircleBacteriaAqueou
7、sextract(mm)VolutiLeoil(mm)10Streptococcuspneumoniae(10cells/ml)8145Staphylococcusaureus(10cells/ml)12155Escherichiacoli(10cells/ml)8135Pseudomonaspyocyanea(10cells/ml)9105Shigelladysenteriae(10cells/
