试管苗的增殖和生根培养.doc

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1、试管苗的增殖和生根培养盐母液:80ml；钙盐母液160ml;有机物母液80ml。lmg/L6-BA取8ml,O.lmg/LNAA取26ml。混匀。c.待琼脂完全溶解后，加入规定用量的蔗糖（2400,待琼脂煮透后端离火源，再加入所需用量的母液（可事先取好放于一烧杯中），最后加蒸憾水至所需体积，即8L。注意：a）、调节培养基的酸碱性至PH5.8b）、培养基的分装，配制好的培养基要趁热分装，培养基分装完后，用封口膜封严瓶口，并用棉线扎紧。本次实验中4L分装到150个左右三角瓶，每人3瓶。2.培养基的灭菌培养基分装后应立即置于高压蒸气灭菌锅内进行灭菌。消毒灭菌吋

2、,压力表读数约为1.06kgfrm-2或0.105MPa（可在0.105〜0.12MPa间,但不得超过0.14MPa）,温度121°C时保持15—30min左右即可。同时将接种工具进行灭菌。3.试管苗转接（1）准备：提前将经过灭菌的培养基、接种工具、吸水纸、器皿及待转接材料放入超净工作台内，打开紫外灯消毒20mino（2）转接：对菊花、香石竹、马铃薯、月季等节间明显的多茎段嫩枝材料，采取切茎段的方式，茎段长lcm左右，带1・2个茎节，或水平放入培养基表面，一刺激侧芽的萌动；对生姜，采取分离芽从的方式扩繁。c.待琼脂完全溶解后，加入规定用量的蔗糖(240g

3、)，待琼脂煮透后端离火源，再加入所需用量的母液(可事先取好放于一烧杯中)，最后加蒸憾水至所需体积，即8L。2.培养基的灭菌培养基分装后应立即置于高压蒸气灭菌锅内进行灭菌。消毒灭菌时,压力表读数约为1.06kgfrm-2或0.105MPa(可在0.105〜0.12MPa间,但不得超过0.14MPa),温度121°C时保持15—30min左右即可。同时将接种工具进行灭菌。3.试管苗转接(1)准备：提前将经过灭菌的培养基、接种工具、吸水纸、器皿及待转接材料放入超净工作台内，打开紫外灯消毒20mino(2)将株高在2.5-3cm以上的大苗接种到生根培养基中，若为

4、丛生苗,需切割分成单苗后再接种；将其余小苗转接到继代培养基中继续扩繁，接种方法同基地培养。4.培养培养室内保持光照时间每天16h,光照强度2000—3000IX,温度(255.观察记载及及结果统计注意检查培养瓶，发生污染要及时清除。定期观察接种材料的生长情况，并作好记录。将结果填如下表：段转入继代培养基中继续扩繁，不要造成浪费。(4)严格按照无菌操作要求，控制污染。3.植物生长调节剂在使用过程中需要注意什么？答：植物生长调节剂，是用于调节植物生长发育的一类农药，包括人工合成的化合物和从生物中提取的天然植物激素。现己发现具有调控植物生长和发育功能物质有胺鲜

5、酯（DA・6）,氯毗腺，复硝酚钠，生长素、赤霉素、乙烯、细胞分裂素、脱落酸、油菜素内酯、水杨酸、茉莉酸、多效噪和多胺等，而作为植物生长调节剂被应用在农业生产中主要是前9大类。植物激素是指植物体内天然存在的对植物生长、发育有显著作用的微量有机物质，也被称为植物天然激素或植物内源激素。它的存在可影响和有效调控植物的生长和发育，包括从细胞生长、分裂，到生根、发芽、开花、结实、成熟和脱落等一系列植物生命全过程。（1）用量要适宜，不能随意加大用量。植物生长调节剂是一类与植物激素具有相似生理和生物学效应的物质，不能过量使用。一般每亩用量只需几克或几毫升。有的农户总怕

6、用量少了没有效果，随意加大用量或使用浓度，这样做不但不能促进植物生长，反而会使其生长受到抑制，严重的甚至导致叶片畸形、干枯脱落、整株死亡。（2）不能随意混用。很多菜农在使用植物生长调节剂吋，为图省事，常将其随意与化肥、杀虫剂、杀菌剂等混用。植物生长调节剂与化肥、农药等物质能否混用，必须在认真阅读使用说明并经过试验后才能确定，否则不仅达不到促进生长或保花保果、补充肥料的作用，反而会因混合不当出现药害。比如：乙烯利药液通常呈酸性，不能与碱性物质混用；胺鲜酯遇碱易分解，不能与碱性农药、化肥混用[2]（3）使用方法要得当。有的菜农在使用植物生长调节剂前，常常不认

7、真阅读使用说明，而是将植物生长调节剂直接兑水使用。因为冇的植物生长调节剂不能直接在水屮溶解，若不事先配制成母液后再配制成需耍的浓度，药剂很难混匀，会影响使用效果。因此，使用时一定要严格按照使用说明稀释。（4）生长调节剂不能代替肥料施用。生长调节剂不是植物营养物质，只能起调控生长的作用，不能代替肥料使用，在水肥条件不充足的情况下,喷施过多的植物生长调节剂反而有害。因此，在发现植物生长不良时，首先要加强施肥浇水等管理，在此基础上使用生长调节剂才能有效地发挥英作用。4•试管苗增殖过程屮应注意哪些问题？答：在试管苗快速繁殖过程中，从外植体到完整的植株冇不同的再分

8、化途径，外植体再分化过程受到材料基因型、材料来源、年龄、部位、生理条件、培养基种