米非司酮对体外培养子宫肌瘤细胞作用的形态学观察.doc

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1、米非司酮対体外培养子宫肌瘤细胞作用的形态学观察作者：姚爱琳，糜若然，崔全新,朱争艳单位：天津市第三中心医院（姚爱琳、朱争艳）;天津医科大学附屈医院（糜若然、崔全新）【摘要】目的观察不同浓度米非司酮作用下体外培养的子宫肌瘤细胞的形态学变化，寻找治疗子宫肌瘤的最佳米非司酮浓度。方法光镜及电镜下观察不同浓度米非司酗（10必〜IO-4mol/L）T体外培养的子宫肌瘤细胞的其形态学变化。结果10-8〜10-7mol/L米非司酮対细胞生长无影响，10-6mol/L以上浓度肌瘤细胞菱缩，10-4mol/L抑制作用垠强。结论米非司酮破坏肌瘤细胞结构，干扰核膜、胞膜、细胞器、及

2、染色体，并与米非司齣浓度成止相关。【关键词】体外培养;子宫肌瘤细胞;米非司酮;形态学[Abstract]ObjectiveToobservethemorphologicalchangesofthehumanleiomyomacellsculturedinthepresenceofmifepristone,andtoexploretheoptimalconcentrationoftreatingleiomyomawithmifepristone.MethodsThemorphologicalchangesofthecellswereobservedundermi

3、croscopeandelectronniicroscope.ResultsTheinhibitoryeffectofmifepristoneonthecellswasonlyexpressedwhentheconcentrationofmifepristonewasrelativelyhigh（10-6mol/L）,andthecellbegantoregression.ConclusionMifepristionemaydestroythestrutureofleiomyomacellsandinterferethemembraneofcellandnuc

4、lei,organsofcell,chromosome.Theinhibitoryeffectofmifepristoneonhumanleiomyomacellsinvitroisconcentrationdependent.【Keywords]cultureinvitro;uterineleiomyoma;mifepristone;morphology子宫肌瘤是激素依赖性肿瘤己被公认，抗孕激素制剂米非司酮用于治疗子宫肌瘤已収得一定疗效，但肌瘤缩小程度差异较大，从0%〜80%不等[1],故人们对米非司酮治疗子宫肌瘤机制进行了不同层面的研究。本研究采用子宫肌瘤

5、细胞体外培养法加入不同浓度的米非司恫，用电镜及光镜观察其结构变化，以了解米非司酮缩瘤的机制，并为临床应用米非司酗治疗子宫肌瘤时剂量的选择提供参考依据。1材料与方法1」标本来源2009年2至6月在天津市第三中心医院于•术室行子宫肌瘤剥除及子宫切除17例患者的肌瘤纽织，患者年龄40〜55岁，并口确认术前3个月未服用过激素类药物。根据月经周期和病理诊断确定子宫内膜分期，口纽•织学诊断确诊子宫肌瘤，并未发现子宫内膜有病理性改变，其中增生期15例，分泌期2例。1.2方法1.2.1子宫肌瘤细胞分离与原代培养:将新鲜的肌瘤组织剪碎成1mm3小块，5g纟

6、[织加入细胞生长液与

7、细胞消化液2：1的混合液20ml中消化,过目筛网除去未消化的组织,离心，得到纯化的子宫平滑肌瘤细胞。用0.04%台盼蓝染色行活细胞计数，观察细胞活力约90%,用细胞生长液调幣细胞种植浓度为2×105/ml,混匀后接种于24孔培养板中，每孔接利*2ml,置37°C5%CO2恒温孵育箱中培养，每2〜3天换液1次。1.2.2米非司酮对肌瘤细胞体外生长的作用:取同批培养成单层生长至融合状态的细胞（5〜7d）,加入米非司酮浓度10-8〜10-4nwl/L,每天记录观察细胞的形态及生长情况，并及时照相。每组均设对照，对照纽•加入等体积无水乙醇。1.2.3米非司

8、酮作用后的肌瘤细胞的超微结构：用1：1的2%乙二胺四乙酸二钠（EDTA）及0.05%的胰蛋白酶2ml加入培养3cl细胞的孔板中消化，离心制成细胞团，2.5%戊二醛固定，PBS液漂洗，10%四氧化饿后固定，乙醇逐级脱水，Epon812环氧树脂包埋。LKBNOVE型超薄切片机切片，厚度为50〜70nm,经酷酸铀和柠檬酸铅染色后，JEOL1010透射电镜观察。2结果2.1米非司酮对体外培养的子宫肌瘤细胞作用的光镜下形态体外培养生长良好的子宫肌瘤细胞呈梭形、或不规则三角形，细胞呈放射状或旋涡状生长，HE染色中-央有卵圆形的核，核旁可见空泡，胞浆饱满（图l）o10-8-

9、10-7mol/L的米非司酮组细胞生长