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时间:2017-12-07
《分析stm与afm的相同点和不同点》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、西安电子科技大学夏玉琼作业•分析STM与AFM的相同点和不同点–相同点•有相似的压电推动机制•测量模式类似,都是将探针在样品表面以恒高或者恒力(恒流)的方式扫描•都可以在水中、空气中或真空中观察样品–不同点•STM测定样品与探针之间的隧穿电流,AFM测定样品与探针之间的作用力•STM只能测定导电样品,AFM可以测定导电和非导电样品1西安电子科技大学夏玉琼作业•画出下图LB膜的制备步骤示意图(类似于pptP59),标出基底的方向和池中表面活性剂的成分2西安电子科技大学夏玉琼生物材料的检测与评价夏玉琼2015/12/20西安电子科技大学夏玉琼提纲•生物相容性的评价指标与方法–
2、生物安全性原则–生物功能性原则•生物相容性的体外评价•生物相容性的体内评价•血液-材料相互作用的测试4西安电子科技大学夏玉琼生物相容性的两大原则•生物安全性原则–消除生物材料对机体器官的毒副作用,如细胞毒性、刺激性、致敏性、致癌性等•生物功能性原则–生物材料在应用过程中能够引起宿主适当的应答,如细胞粘附、铺展、增殖、分化以及细胞生长因子的表达等5西安电子科技大学夏玉琼生物安全性原则•体外细胞毒性试验–MTT法–DNA合成检测方法–细胞膜完整性测定•遗传毒性和致癌试验–Ames试验–体外染色体畸变试验–微核试验–基因检测(原癌基因激活、抑癌基因失活)•血液相容性评价方法–体
3、外和体内的凝血、血小板、血栓形成、免疫学和血液学等6西安电子科技大学夏玉琼MTT(噻唑蓝)法•用于检测材料对细胞的毒性线粒体还原酶甲瓒活细胞越多,生成不溶于水,溶于DMSO的甲瓒越多,其DMSO溶液颜色越深7https://en.wikipedia.org/wiki/MTT_assay西安电子科技大学夏玉琼DNA合成检测方法•经典方法–用放射性氚3H标记胸苷–用无放射性BrdU,其摄入量可以通过测定抗BrdU的单克隆抗体得到•缺点–需要严苛的破坏细胞的条件,保证单克隆抗体与BrdU的结合5‐溴脱氧尿嘧啶核苷http://quintaisimortais.blogspot.
4、com/2014_10_05_archive.html8http://www.arthritis‐research.com/content/figures/ar7‐2.jpg西安电子科技大学夏玉琼DNA合成检测方法•新方法–采用其他标记的核苷酸替代BrdU–只需采用温和的破坏细胞的方法,操作简便9http://www.jenabioscience.com/cms/en/1/catalog/2499_dna_synthesis_monitoring_cell_proliferation.html西安电子科技大学夏玉琼细胞膜完整性测定•将细胞与FDA染料和EB染料共培养:–若
5、细胞膜完整,发绿光:FDA(二乙酰荧光素)可穿透细胞膜,积累到细胞中,发生水解反应生成绿色荧光素(488/530nm)488/530 nm–若细胞膜不完整,发红光:只有细胞膜不完整时,EB(溴化乙锭)才可进入细胞,结合DNA,发出红光(285/605nm)10http://www.dojindo.com/store/p/168‐Cellstain‐FDA.html, http://wellpath.uniovi.es/es/contenidos/seminario/tecnicas_imagen/images/Fda‐1st.gifhttps://www.mun.ca/b
6、iology/scarr/IG11614.jpg, http://www.biomedcentral.com/content/figures/1471‐2180‐9‐156‐3‐l.jpg西安电子科技大学夏玉琼生物功能性原则•主要采用体外方法–对细胞功能的影响•细胞粘附•细胞铺展•细胞增殖•细胞生物合成功能–对细胞功能的生物学评价•细胞粘附分子(CAM)•细胞因子和生长因子•基质金属蛋白酶MMP11西安电子科技大学夏玉琼对细胞功能的影响•细胞粘附–测定细胞附着于材料表面的数量随时间的变化–使用光学显微镜观察细胞图像随时间的变化–用酶标仪测定材料浸提液的96孔板上的紫外吸
7、收,推算细胞数量,推断细胞粘附性质•细胞铺展–评价细胞是否能够粘附与表面并增殖至将表面完全覆盖–使用SEM12西安电子科技大学夏玉琼对细胞功能的影响•细胞增殖–研究材料如何影响细胞的生长•细胞生物合成功能–研究在材料与细胞接触后,细胞生物合成的物质与对照细胞相比,是否增减,是否合成新的物质13西安电子科技大学夏玉琼对细胞功能影响的生物学评价•植入材料与细胞作用后,是否影响以下分子的表达–细胞粘附分子CAM•CAM是表达在细胞表面的分子,能够控制和促进细胞与其它细胞的相互作用–细胞因子和生长因子•细胞因子,是调节免疫反应和炎症反
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