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《nyt 562-2002 动物衣原体病诊断技术.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ICs11.220s41中华人民共和国农业行业标准NY/T562----2002动物衣原体病诊断技术Diagnostictechniquesforanimalchlamydiosis2002一08一27发布2002一12一01实施中华人民共和国农业部发布491NY/T562-2002前言衣原体病是由衣原体感染引起的一类具有公共卫生意义的自然疫源性疾病11前己发现鸭、火鸡、鸡、鸽、鹅等140余种禽鸟和数十种哺乳动物,如绵羊、山羊、牛、耗牛、马、骡、驴、猪、犬、猫、兔、豚鼠、小鼠等可被衣原体感染,表现不同症状或呈亚临床经
2、过衣原体病病畜禽对人类的健康构成直接威胁,人与病畜禽接触,往往会被感染,表现感冒样症状、眼疾和孕妇流产等因此加强对本病的口岸检疫具有十分重要的公共L?生学意义衣原体属包括:鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsiltaci)、反色动物衣原体(Chlamydiapean-um)、沙眼衣原体(Chlamydiatrach(,matis)和肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae),这4种衣原体具有共同的特异性属抗原引起动物衣原体病的病原主要为鹦鹉热衣原体和反当动物衣原体,而沙眼衣原体感染猪一般呈隐性经过在80年代
3、,衣原体病补体结合试验(CF)操作规程和间接血凝试验(IHA)操作规程已被分别纳人农业部颁布的动物检疫规程,多年来被广泛地用于畜禽衣原体病监测和诊断本标准的附录A、附录B,附录C、附录E和附录F为规范性附录,附录D为资料性附录本标准由农业部畜牧兽医局提出本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位中国农业科学院兰州兽医研究所。木标准主要起草人:邱昌庆、高双娣、周继章、FKI礼{。NY/'r562-2002动物衣原体病诊断技术1范围本标准规定了补体结合试验(CF)的直接法与间接法和间接血凝试验CIIIA)技
4、术本标准的直接补体结合试验(T)CF)适用于猪以外的哺乳动物和鹦鹉、鸽(老龄鸽除外)衣原体病的进出境检疫和定性诊断间接补体结合试验(ICF)适用于禽鸟(鹦鹉、鸽除外,但包括老龄鸽)和猪衣原体病的进出境检疫和定性诊断;IHA试验适用于动物衣原体病的产地检疫、疫情监测和流行病学调杳。2补体结合试验(CF)2.1材料准备2.1.1器材:12mmX37mm试管、试管架、水浴箱、U型96(8X12)孔微量滴定板、生理盐水。2.1.2补体:商品补体,按说明书使用和保存,试验前对供试补体需经补体效价滴定。补体效价滴定方法见附录Ae
5、2.1.3溶血素:试验前对供试溶血素需经效价滴定。溶血素效价滴定见附录ti2.1.4100绵羊红细胞悬液,制备方法见附录Co敏化红细胞制备见第A.2章。2.1.5被检血清,应无溶血、无腐败(可加入。.010n硫柳汞或0.2Y,叠氮钠防腐),试验前需灭能。不同畜禽血清灭能的温度和时间见附录D,2.1.6标准抗原和标准阳性、阴性血清(抗原和阳性血清效价滴定的方法见附录E),指示血清”。2.2操作方法2.2.1直接补体结合试验(DCF)(包括试管法和微量法)2.2.1.1试管法按表1的程序操作。试验要同时设抗补体对照、阳性
6、血清对照、阴性血清对照、抗原对照、溶血素对照和生理盐水对照2.2.1.2微f法用U刑96孔反应板,按表2的程序操作。试验同时设抗补体对照、阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对照、溶血素对照和生理盐水对照。2.2-1.3DCF试验结果判定在最后一次37C水浴30min后,立即进行试验结果判定。表1直接补体结合试验(试管法)单位为毫升被检血清对照下丁可丽阳蔺性可一RA订}{生生理理成分试验管杭抗补补体体{_}}抗抗原原!浴溶血血萦素}效价{血皿清w{皿x}}}盐盐水水I:aI:8I:16I:321:64一一1:‘281:4
7、2工作量t:42上作量血清(〕.10.10.10.10.1〔(10.一e14)上。‘’I)指示血清与该抗原相应的哺乳动物抗休Nv/T5622002表1(续)单位为毫升十卜十+表2直接补体结合试验(微t法)单位为微升被检血清各项对照阳性阴性生理成分试验孔抗补体抗原溶血素效价血清血清盐水}瓜}仁1:习81,::116611卜:3322一11::6614下1:万1雨281:42工作量1‘飞2仁作量一一l2几2525252525252汤血,。一一(气5;)2几252弓25252525251}即一一2单位岛口石O5O5口5(少
8、万口5O5O刘一二}〔50补体生理盐水25艺550100混匀古(、16h~18h感作取出后37〔水浴3om生n一蔽而呵:可叮一二竺土且_卫巨州_生巨_犷三工州_5。一混匀,37C水字华十卜,}十十十去十二+++},)「렱1{1,{一1.!一判定个不个不75%全不全不1:32补纬叩%全溶血全溶血全溶血全溶血全溶血洛血溶血溶血溶血洛血落血洛血2.2
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