NY T 402-2000 脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测技术规程.pdf

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1、B15N.,中华人民共和国农业行业标准NY/T402-2000脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测技术规程Rulesforvirusdetectionofvirus-freeseed(seedling)sweetpotatoes2000一09一22发布2000一12一01实施中华人民共和国农业部发布NY/T402-2000前言为了有效地实施对脱毒甘薯种薯(苗)质量检验和管理，规范脱毒甘薯种薯(苗)市场，促进甘薯脱毒技术推广，实现脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测的规范化、标准化，特制定本规程。本规程在参照国内外甘薯病毒检测技术最新研究进展的基础上，结合当前国内生产实际，力求达到快速

2、、准确、可操作性强的检测要求。检测对象主要选择生产上发生分布范围广、危害性大的病毒。检测方法主要采用指示植物检测和斑点酶联免疫吸附检测方法。本规程内容包括脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测的适用范围、检测对象、抽样方法、检测方法和质量要求。本标准的附录A、附录B都是标准的附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准主要起草单位:农业部植物脱毒种苗质量监督检验测试中心(济南)、山东省植物保护总站。本标准主要起草人:孙作文、商明清、李明立、刘敬东、杨勤民、任宝珍。中华人民共和国农业行业标准脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测技术规程NY/T402-2000Rulesforvirusd

3、etectionofvirus-freeseed(seedling)sweetpotatoes1范围本标准规定了脱毒甘薯种薯(苗)的病毒检测方法和操作规程。本标准适用于脱毒甘薯种薯(苗)的病毒检测。2定义本标准采用下列定义。2.1脱毒苗应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗，经检测确认不带甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)和甘落潜隐病毒(SPLV)，才确认是脱毒苗。2.2脱毒种薯(苗)从繁殖脱毒苗开始，经逐代繁殖增加种薯(苗)数量的种薯(苗)生产体系生产出来的。分原原种、原种、生产用种三个级别。2.2.1原原种pre-elite用脱毒苗在防虫网室、温室条件下生产的符合质

4、量标准的种薯(苗)。2.2.2原种elite用原原种作种薯，在良好隔离条件下生产出的符合质量标准的种薯(苗)。2.2.3生产用种certifiedseedorseedling用原种作种薯，在隔离条件下生产出的符合质量标准的种薯(苗)。2.3病毒病株允许率指各级甘薯种薯(苗)繁殖田中病毒病株的允许比率。3检测对象甘薯羽状斑驳病毒(Sweetpotatofeatherymottlevirus,SPFMV)=甘薯潜隐病毒(Sweetpotatolatentvirus,SPLV),4抽样41组培苗抽样4.1.1脱毒核心材料:每株必须检测。4.1.2扩繁苗:随机抽取l0o-

5、2%的扩繁苗检测。4.2田间抽样4.2.1原原种和原种抽样:定植后30天、60天、收获前2周，在目测全田的基础上，采用五点取样法，中华人民共和国农业部200。一09.一22批准2000-12一01实施tNY/T402-2000抽样数量为。.1hm'以下200株;o.11一1hm2500株;超出1hm'面积，划出另一检验区，按本规程规定的面积取样。每株取上、中、下部叶片1-5g，低温保湿存放，24h内检测。4.2.2生产用种抽样:定植后30天、收获前两周，在目测的基础上，采用随机取样法，0.1hm2以下检验2点，每点100株;0.11^-1hm，检验五点，每点100

6、株;1.1^-5hm，检验10点，每点100株;超出5hm，面积，划出另一检验区，按本规程规定的面积取样。取样方法及样品保存同4.2.1,4.3商品种薯(苗)抽样没有经过田间检验的种薯(苗)必须进行块根或种苗检验。4.3.1根据甘薯种薯(苗)不同存放方式，采用分层设点取样或随机取样，抽样数量见表1,表1抽样数量标准表种类种薯(苗)总量抽样百分率,%抽样最低数量c10000株6--10100株薯苗>10000株3.5簇1ooookg6-10lookg种薯>10000kg3-5注不足抽样最低数量的全部作为混合样品。2将第一次抽取的样品混合后，进行二次抽样，随机抽取10

7、%的混合样品检测。5检测方法5.1X点酶联免疫吸附(Dot-ELISA)检测法用于检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯潜隐病毒，检测方法见附录A,5.2指示植物检测法用于辅助检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯潜隐病毒，检测方法见附录B,检测甘薯病毒的指示植物及症状见表2,表2检测甘薯病毒的指示植物及症状病毒种类}指示植物}症状SPFMV巴西牵牛羽状斑驳SPLV巴西牵牛叶脉变黄6质t要求凡斑点酶联免疫吸附检测或指示植物检测呈阳性者为带毒薯(苗)。原原种:病毒病株允许率是。。原种:病毒病株允许率<-2.。%。生产用种:病毒病株允许率(10000NY/T402-2000附录A(标准的附录

8、)斑点酶联