农业微生物配套实验实验一细菌革兰氏染色法.ppt

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1、农业微生物学实验微生物教研室2010秋季学期植物生产类各专业实验内容实验一细菌革兰氏染色法实验二培养基的制备及灭菌实验三稀释平板分离计数法实验四微生物菌落特征观察及描述实验报告书写和实验要求1一个实验技术内容写一份报告。2实验内容包括实验目的、原理、操作步骤及实验结果,强调的是不能将书本上的搬到实验报告中,必须是你真实完成的步骤及对应每步的结果反映在你的报告中。3要求绘图时必须用铅笔描绘,用一个圆表示从显微镜看到的视野,标明菌名、放大倍数等。大肠杆菌10×1004实验结束后要求每位同学将自己使用过的仪器和玻璃器皿打扫干净,并放回原处,保持实验室整洁,每次实验全班留一组同学打扫实验

2、室卫生。农业微生物学实验实验一细菌革兰氏染色法1.本实验的目的和要求了解革兰氏染色的原理,学习并掌握革兰氏染色的方法。2.实验内容和原理革兰氏染色法(Gramstain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的,在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,

3、因此,呈现蓝紫色;革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色。3.需用的仪器和试剂等大肠杆菌,枯草芽孢杆菌;革兰氏染色液,载玻片,接种环、显微镜等。4.实验步骤样品涂片——干燥——固定——草酸铵结晶紫初染约1min——水洗——碘液媒染约1min——水洗——95%酒精脱色20―30s——立即水洗——番红液复染1―2min——水洗——干燥——镜检2021/9/2092021/9/20105.实验报告要求在你所作的革兰氏染色制片中,大肠杆

4、菌和枯草芽孢杆菌各染成什么颜色?它们是革兰氏阴性菌还是革兰氏阳性菌?绘图。

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