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1、第32卷第3期大连海洋大学学报Vol.32No.32017年6月JOURNALOFDALIANOCEANUNIVERSITYJune2017DOI:10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.03.011文章编号:2095-1388(2017)03-0323-06虾夷扇贝苗种培育水中可培养细菌群落分析1122231孙雪莹,刘继晨,李明,赵学伟,梁峻,孙丕海,马悦欣(1.大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连116023；2.獐子岛集团股份有限公司,辽宁大连116001；3.大连海洋大学海珍品苗种培育基地,辽宁大连11602
2、3)摘要:为研究虾夷扇贝Patinopectenyessoensisis苗种培育过程中幼体发育5个时期苗种培育水中(受精卵期水样W1,担轮幼虫期水样W2,D型幼虫期水样W3,壳顶幼虫期水样W4,稚贝期水样W5)可培养细菌的群落组成,采用传统培养方法,从每个水样分离细菌30株,通过16SrRNA基因测序分析鉴定细菌。结果表明:分离的150株细菌可归为2门、3纲、6目、9科、10属、22种；在门水平,W1~W5的优势门均为变形菌门,其次为厚壁菌门；在属水平,假交替单胞菌属为所有水样第一优势属,此外,W1的优势属依次为交替单胞菌属、弧菌属和海杆菌属,W2
3、的优势属依次为弧菌属、交替单胞菌属和Cobetia,W3的优势属依次为弧菌属、交替单胞菌属和芽孢杆菌属,W4的优势属依次为交替单胞菌属、芽孢杆菌属和弧菌属,W5的优势属依次为弧菌属、Pseudophaeobacter、芽孢杆菌属和赤杆菌属。研究表明,扇贝幼体不同发育时期苗种培育水中所含可培养细菌种类比较丰富,细菌群落结构存在差异。关键词:虾夷扇贝；育苗培育水；16SrRNA基因；细菌群落中图分类号:S917.1文献标志码:A水产养殖过程中,尤其是在敏感的幼体饲养阶系统的调控与管理及病害防治提供参考。段,水质对健康动物的生长发育至关重要。水质指1材料
4、与方法标包括物理、化学指标,以及所含细菌的数量和类「1」型。细菌性疾病是世界范围内水产养殖生产的1.1材料最大限制因素之一,其中弧菌属细菌是最常报道的「2-4」病原体。虾夷扇贝苗种培育在獐子岛海珍品原良种场进细菌的来源之一是苗种培育过程中使用的海行,将经过沙滤和沉淀处理后的海水100L加入塑「5」水。Sandaa等研究发现,大扇贝Pectenmaximus料桶中,扇贝幼体养殖密度为5~6只/mL,每天苗种培育过程中,不同养殖系统(静态系统、循7:00~8:00换水1次,每次换水50L。饵料以环水系统和经过臭氧处理的循环水系统)水中细叉鞭金藻Dicr
5、ateriainornata为主,孵化初期,每天「6」菌群落结构高度相似。Godoy等研究表明,使用投喂叉鞭金藻3次(8:00、15:00、23:00),5抗生素处理紫扇贝Argopectenpurpuratus幼体,其养每次100mL「(7~9)×10cells/mL」,至受精后6殖水中可培养细菌的数量和优势属与未处理组不7d,补充添加10mL「(2~4)×10cells/mL」新同,幼体存活率也不同。在虾夷扇贝Patinopecten月菱形藻Nitzschiaclosterium,随后每天增加10yessoensisis苗种培育过程中,常发生苗
6、种大量死亡mL,至100mL时不再增加,后续试验中每天投喂的现象,已证明灿烂弧菌Vibriosplendidus和塔斯马饵料3次,每次添加叉鞭金藻和新月菱形藻各100尼亚弧菌Vibriotasmaniensis是扇贝幼体死亡的致病mL。通过气石充气,水温保持在(15±1)℃,盐「4」菌,目前,尚不清楚苗种培育水中细菌是否与度为(32±0.5)。幼体疾病相关。本试验中,使用传统培养方法和1.2方法16SrRNA基因序列分析了扇贝幼体不同发育时期苗种培育水中细菌群落组成,以期为苗种培育生态1.2.1样品的采集于2014年3-4月在虾夷扇收稿日期:201
7、6-06-02基金项目:国家科技支撑计划项目(2013BAD23B01)；獐子岛集团资助项目(99801214)作者简介:孙雪莹(1989-),女,硕士研究生。E-mail:sunxueying1109＠163.com通信作者:马悦欣(1963-),女,博士,教授。E-mail:mayuexin＠dlou.edu.cn324大连海洋大学学报第32卷贝幼体发育的5个时期,无菌采集苗种培育水样1表1扇贝苗种培育水中异养细菌数量L(3个苗种培育桶各采集500mL混合),受精卵、Tab.1Heterotrophicbacterialcountsinthew
8、aterofscal-担轮幼虫、D型幼虫、壳顶幼虫和稚贝时期的样品loplarvarearingtanks水样-1分别标记
