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1、第30卷第1期大连海洋大学学报Vol.30No.12015年2月JOURNALOFDALIANOCEANUNIVERSITYFeb.2015DOI:10.3969/J.ISSN.2095-1388.2015.01.002文章编号:2095-1388(2015)01-0006-07维氏气单胞菌感染对西伯利亚鲟血清指标和hsp70基因表达的影响田照辉,徐绍刚,朱华,胡红霞,王巍,董颖(北京市水产科学研究所暨国家淡水渔业工程技术研究中心(北京),渔业生物技术北京市重点实验室,北京100068)摘要:为研究西伯利亚鲟Acipe
2、nserbaerii在维氏气单胞菌Aeromonasveronii感染过程中的生理免疫反应,进行了维氏气单胞菌攻毒试验,将体质量为(260.2±37.8)g的西伯利亚鲟从背部肌肉注射菌液浓度为2.0×710cfu/mL的维氏气单胞菌,注射后40h后开始死亡,62h后停止死亡,累积死亡率为46.7%。结果表明:40h对照组和53h处理正常鱼组中的血清皮质醇含量最低,与不再出现死亡后的处理组和对照组无显著性差异(P>0.05),与处理患病鱼各组有显著性差异(P<0.05);62h处理组血清超氧化物歧化酶(SOD)活力最低,
3、与40h对照组、53h处理组、53h处理正常鱼组、93h对照组、93h处理组有显著性差异(P<0.05);93h处理组血清丙二醛(MDA)含量最低,与40h处理组、44h处理组、53h处理正常鱼组、62h处理组有显著性差异(P<0.05),其他各组之间无显著性差异(P>0.05);各处理组血清溶菌酶(LZM)活力从44h开始升高,直到62h,各个处理组均显著高于40h的处理组和对照组以及93h和168h的对照组和处理组(P<0.05);实时定量了肝、鳃、脾、肠组织中hsp70基因表达的变化。研究表明:西伯利亚鲟感染维氏
4、气单胞菌后,血清皮质醇含量和溶菌酶活力升高可作为机体免疫状态的参考指标;热休克蛋白hsp70基因的诱导表达较血清指标变化更为灵敏,hsp70基因在鳃组织最先有较高的诱导表达。关键词:西伯利亚鲟;维氏气单胞菌;细菌感染;血清指标;热休克蛋白hsp70基因中图分类号:S917.4文献标志码:A热休克蛋白是机体应激产生的一组具有高度同的鲟鱼养殖品种,常被作为软骨硬鳞类生物学模型源性的蛋白,热休克蛋白表达的提高可以减少蛋白动物。西伯利亚鲟在野生状态下抗病力很强,生活错误折叠和变性蛋白的数量,从而增加细胞的活在西伯利亚勒拿河的鲟
5、鱼,几乎不会被各种病原微[1][5]力。HSP70不仅是分子伴侣,而且和非特异性生物和寄生虫感染,但在人工养殖条件下,养4+免疫相关,可活化CDT细胞,产生1L-10,从而殖户为追求产量,盲目加大养殖密度,同时缺乏科[2]+抑制Th-1细胞介导的过度炎症反应。在免疫过学管理,鲟鱼长期忍受低溶氧、高NH-N等因子4程中,HSP可上调巨噬细胞、单核细胞分化的标胁迫,致使其抗病力下降,增加了对病原菌的易感记;在宿主细胞与HSP70结合时,会识别肿瘤细性,病害增加,近年来鲟鱼养殖病害问题已经凸[5-10]胞相关多肽;可修复细胞
6、损伤和防止由于细胞内在显,并造成了巨大的经济损失。气单胞菌是西[3][5]防御系统引起的细胞自溶和凋亡。病原体通过伯利亚鲟重要的条件致病菌,赵凤岐等、马志[6]释放活性氧、阳离子抗菌肽、溶菌酶和细胞因子等宏等已从患病鲟鱼中分别分离鉴定出嗜水气单物质,破坏细胞内部结构,从而改变细胞内稳态,胞菌Aeromonashydrophila和维氏气单胞菌Aero-[4]诱导HSP表达。monasveronii。为研究西伯利亚鲟在维氏气单胞菌鲟鱼为古老的软骨硬鳞类,是大型水生经济动感染过程中的生理免疫反应,本研究中进行了维氏物,具有
7、重要的科研、经济价值。西伯利亚鲟Aci-气单胞菌攻毒试验,测定细菌感染前后鲟鱼血清指pernserbaerii隶属于鲟形目、鲟科、鲟属,是重要标和hsp70基因表达的变化,旨在为鲟鱼病害研究收稿日期:2014-06-02基金项目:科技部支撑计划项目(2012BAD26B05);国家科技支撑计划项目(2012BAD25B03);北京市科技计划项目(D121100003712002);现代农业产业技术体系北京市鲟鱼、鲑鳟鱼创新团队项目(SCGWZJ20151104-2)作者简介:田照辉(1973—),女,高级工程师。E-m
8、ail:tzhhui@126.com通信作者:朱华(1972—),男,博士,研究员。E-mail:zhuhua@bjfishery.com第1期田照辉,等:维氏气单胞菌感染对西伯利亚鲟血清指标和hsp70基因表达的影响7和抗病选育提供参考。只在有代表性的3个时间节点即试验组开始死亡时、停止死亡时和试验结束时取样,即40、93、1材