苹果茎沟病毒传播途径研究.pdf

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1、分类号：密级：$661．6学号：～2008325苹果茎沟病毒传播途径研究StudyontheVerticalTransmissionRouteofAppleStemGroovingVirus学位申请人：曹晓风指导老师：孙建设教授邵建柱教授学科专业：果树学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一一年六月四日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逦曼量壅些太堂或其他

2、教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。．学位论文作者签名：‘。费魄风签字日期：2011年／月占日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解洹j匕壅些太堂．有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权泣j匕壅些太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：‘聋I魄

3、风导师签名：№诅签字日期：．知f7年Z月亏日签字日期：丑J7年g月占日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要苹果病毒具有危害性强、传播扩散快和难以治愈等特点。目前苹果病毒的危害在我国节果生产上呈现上升势头，苹果茎沟病毒是潜隐性病毒中危害重、脱除难的重要病毒之一，研究该病毒传播途径，尤其是明确种子传毒的几率迫在眉睫。本试验以携带苹果茎沟病毒红富士苹果树产的果实及种子为材料，研究了苹果不同部位成熟组织RNA的提取，并以RT-PCR为检测手段研究了此种病毒在果实及种子内部的分布；以携带该病毒的八棱海棠种子为材料

4、，利用RT-PCR为检测手段研究了苹果茎沟病毒的种子传毒率；以脱毒的王林苹果继代组培苗为材料，采用RT-PCR技术为检测手段研究了该病毒是否能通过汁液传播o．主要结果如下：．1同一提取液提取苹果不同部位总RNA时，植物材料最佳用量不同；不同提取液提取苹果同一部位总RNA时，植物材料最佳用量也不相同。RNAisoPlus和RNAiso．mateforPlantTissue搭配使用时，植物材料的最佳用量为：种皮0．0259，胚0．059。使用RNAplant植物总RNA提取试剂时，植物材料最佳用量为：果皮0．0759，果肉0．25

5、9，种皮0．0159，胚0．0259。2苹果茎沟病毒侵染的苹果树生产的果实，其果皮、果肉均携带病毒。3苹果茎沟病毒通过侵染种皮表面组织致使种子带毒，但是种胚不带毒。氢氧化钠或磷酸三钠可以有效灭活种皮表面携带的苹果茎沟病毒，磷酸三钠表面处理后，种子的发芽率显著高于氢氧化钠处理后种子的发芽率。4苹果茎沟病毒在八棱海棠上可以通过种子传播，携带有该病毒的母树生产的种子实生苗带毒率为5．89‰。5在组织培养条件下，ASGV可以通过汁液进行传播，通过汁液传播的几率为2．08％。关键词：苹果茎沟病毒传播途径种子传毒RT-PCRStudyon

6、theVerticalTransmissionRouteofAppleStemGroovingVirusAuthor：CaoXiao-fengMajor：PomologySupervisor：SunJian--sheShaoJian-·zhuAbstractAppleviruswascharacterizedbyitsstrongharm，fastspreading，hardtocureandSOon．TheimpactsofappleviresonChinaAppleProductionisincreasingatprese

7、nt．Theapplestemgroovingvirus，whichhasstrongharmtoAppleProductionandisdifficulttoremove，isoneoftheimportantapplelatentrecessivevirus．Therefore，theresearchonthisvirusspreadingwaysisveryimportant．Whetherthevirusistransmittedthroughseeds，andespeciallycleatingtheprobabil

8、ityisimminent．TheRNAextractionofmaturetissuefromappleskin，fruitflesh，seedcoatandembryos，andthedistributionofapplestemgroovingvirusinfruita