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《纳米细菌纤维素的制备及其超微结构镜观察.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、纳米细菌纤维素的制备及其超微结构镜观察作者：朱昌来，李峰，尤庆生，陆松华，王庆庆，林琳，张天一【摘要】制备细菌纤维素，观察纳米细菌纤维索的超微结构特点。用红茶菌做菌种，通过茶水发酵培养制备纳米细菌纤维素，利用扫描电镜、透射电镜观察其超微结构特点。结果表明：新鲜制备的细菌纤维素膜为无色透明胶冻状膜，表面光滑；经预处理后呈乳白色半透明胶冻状；扫描电镜下可见细菌纤维素膜呈疏松的网状结构，纤维素微纤丝从菌体胞壁小孔屮分泌出来；透射电镜下，经负染后，在深色的背景中间可见浅色细丝状。说明细菌纤维素具有良好的纳米纤维网络特征，在生物医学领
2、域具有良好的、广泛的应用前景。【关键词】纳米材料；细菌纤维素；超微结构；组织工程；电子显微镜Abstract:Topreparethebiomaterialbacterialcellulose(BC)andobservethecharacteristicofitsultra-structure・Red-teafunguswasusedastheculturingstrain,andnanometerbiomaterislBCproducedthroughfernientationoftea.,thentheultra-str
3、uctureofnanometerbiomaterialBCwasobservedbySEMandTEM.ResultsshowedthatBCmembranesthatfreshpreparedwassmooth、colorlessandjelalikeanditshowedtranslucenceafterpre-disposaltreatment・ThesurfaceofBCmembraneswasporousnetworkstructureobservedbySEM,andthemicro-fibrilsofBCwe
4、resecretedfromtheeyeletofcellwal1.TintfinethreadcouldbefoundindarkbackgroundafternegativestainingobservedbyTEM・TtprovesthatBChasfinenanofibre-network,whichhasextensiveusageinbiomedicineareas・Keywords:Nanometermaterial；Bacterialcellulose；Ultra-structure；Tissueengine
5、ering；Eletronmicroscope1引言细菌纤维素(bacterialcellulose,BC)是由微生物(主要为细菌)发酵形成的一类纤维素，是葡萄糖以B-1,4-糖昔链连接形成的高分子化合物，它与植物纤维素化学组成非常相似，因其在吸水性、物理和机械性能等诸多方面的优良性能，在医药、生物医学工程、造纸和食品工业等领域中具有广泛的应用前景，是国际生物医用材料研究的热点之一。本研究用红茶菌做菌种，通过茶水发酵制备纳米细菌纤维素,同时通过对扫描和透射电镜下细菌纤维素的结构的观察，深入了解其纳米级的结构特点。2材料和方法
6、2.1材料红茶菌菌种（购自黑龙江黑河）、葡萄糖（AR）、蔗糖（AR）、乙醇（食用级）、蛋白月东、市售绿茶。扫描电子显微镜（S-3400N,Hitachi）,透射电子显微镜（JEM-1230,JE0L）o2.2方法2.2.1基础发酵培养基的配制按绿茶（干基）：糖：水=0.5:100:1000,先将水煮沸,加入绿茶浸泡于85〜90°C温度,保持20min,滤去茶叶渣得到绿茶汁，按比例加入溶化的糖水（其中葡萄糖和蔗糖的比例为1：1）,再加入0.5%蛋白月东、1%乙醇（V/V）,混匀后分装到三角瓶屮，每500ml装入200ml糖茶水
7、，用牛皮纸包扎，巴氏消毒后冷却到室温备用。2.2.2接种培养红茶菌菌种放入消过毒的浅盘中，倒入适量基础发酵培养基，在30°C恒温条件下静止培养7天。2.2.3细菌纤维素的提取和处理恒温静置培养7d后，生成细菌纤维素膜浮于液面。膜取出后，用蒸馄水多次冲洗，除去膜表面培养基及杂质。再将膜浸泡于0.lmol/L的NaOH溶液,100°C煮沸20min,去除液膜中的菌体和残留培养基，膜呈乳口色半透明。将以上制得的细菌纤维素膜置于装有生理盐水的烧杯中，以12TC高压消毒20min备用。2.2.4纳米细菌纤维素超微结构观察取纳米细菌纤维
8、素膜lcm2左右，干燥后直接于离子溅射仪上喷镀金属钳，然后在SEM下观察标本结构；将纳米细菌纤维素经超声粉碎后制成纤维素悬液，经4%磷餌酸负染后于TEM下观察。3结果与讨论3.1恒温静置培养7d后，生成细菌纤维素膜，经提取和预处理后呈乳白色半透明胶状液膜，外表均匀光滑，有一定的张力，见图1
