微生物细胞大小的测定(精).ppt

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1、微生物学实验中南民族大学工商学院环境与生物工程实验教学中心实验二微生物细胞大小的测定•一、实验目的•二、实验原理•三、实验器材•四、实验方法•五、实验结果•六、思考题一、实验目的•了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。•增强微生物细胞的大小的感性认识。二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体小，只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10mm长度刻成100等

2、分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。目镜测微尺镜台测微尺镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将1mm等分成100格，每格长0.01mm（即10µm）。它并不直接测细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。·由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。由于已知镜台测微尺每格长10µm，根

3、据下列公式即可分别计算出在不同放大倍数下目镜测微尺每格所代表的长度。镜台测微尺格数×10目镜测微尺每格长度（µm）=-----------------目镜测微尺格数注：球菌用直径来表示其大小；杆菌则用宽和长的范围来表示。三、实验器材•1．材料：酵母斜面菌种。•2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、载玻片、滴管、滴瓶、擦镜纸。四、实验方法用镜台测微尺进行校正取得该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度（A）菌体大小的测定微生物细胞相当于目镜测微尺的长度（B）细胞的实际大小（L＝A×

4、B）取下镜台测微尺，将微生物染色标本置于载物台上，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。在低倍镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合，然后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正。装目镜测微尺菌体大小的测定•(1)将酵母菌斜面制成一定浓度的菌悬液•(2)取一滴酵母菌菌悬液制成水浸片。•(3)移去镜台测微尺，换上酵母菌水浸片，先在低倍镜下找到目的物

5、，然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量酵母菌菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。1.目镜测微目尺校正结果五、实验结果将实验结果填入下列表格物镜（μm）目尺格数台尺格数目尺校正4×10×40×100×2.菌体测定结果微生物名称目镜测微尺宽长菌体每格代表的目镜测微宽度目镜测微长度大小范围长度/µm尺格数/µm尺格数/µm注意事项1.校正目镜测微尺时光线宜弱些，以便找到镜台测微尺的刻度。2.换高倍镜和油镜时要十分小心，防止压坏镜台测微尺和损坏镜头。3.测量对象要有代表性，数据及单位换算要准确。六、思考题1.

6、如何保证安全准确的校正目镜测微尺？2.为什么更换不同放大倍数的物镜和目镜时要重新校正测微尺？