分子遗传学15翻译A.ppt

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1、第十五章蛋白质的合成,转运和加工第一节氨基酰-tRNA的形成及核糖体的作用位点一.氨基酰tRNA分子的形成氨基酸的活化活化:aa+ATP+E*氨基酰-AMP-E+PPi转移:氨基酰-AMP-E+tRNAaa-tRNA+AMP+E二.氨酰tRNA合成酶的鉴别功能动力学校对(Kineticprofreading)化学校对(Chemicalproofreading)三核糖体的作用位点⑴A位点(或称acceptorsite)可以进入氨基酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)。⑵P位点(或称供位,donor

2、site)是被肽基酰-tRNA(peptidyl-tRNA)所占据。(3)E位点(Exitsite)脱酰tRNA(deacylated-tRNA)短暂地占据。第二节肽链的合成一.在细菌中翻译的起始⑴IF-3是30S亚基与mRNA起始位点的特异结合所必须的。⑵IF-2是特异地和起始tRNA结合并把它带到起始复合体中。⑶IF-1仅作为完整的起始复合物的一部分,可能和起始复合物的稳定性有关,而不是提供任何识别特异成份。2.起始复合物的形成(1)IF-3和核糖体30SrRNA结合使16SRNA和mRNA的S-D

3、顺序结合a.使30S保持游离b.形成起始复合体I(2)IF-2+GTP+氨酰甲硫氨酸中间复合体。(3)IF-1置换出IF-3,50S亚基可和30S亚基结合。(4)50S+30S复合体III,释放IF-1,IF-2。原核生物翻译起始因子二.起始tRNA的特点翻译时的第一个密码子是怎样被识别的呢?(一)小亚基上16SrRNA3′端的六核苷酸(3′-UCCUCC-5′)和Shine-Dalgarno顺序(5′-AAACAGGAGG-3′)互补,相互结合,使下游的AUG起始密码子定位在P位上。(二)核糖体结合位

4、点也含有一个信号起始密码子(initiationcodon)-AUG。起始和延伸Met-tRNAs的区别⑴两种tRNA本身有差别;⑵氨基酸的状态不同。fMet-tRNA与Met-tRNA有什么不同?⑴Met-tRNAmMet在受体臂末端的一对碱基是GC,在fMet-tRNAfMet是CA,C可以和延伸因子IF-2结合。⑵tRNAfMet在反密码子环的茎上有3对G-C,若发生突变将会阻止其进入P位点。⑶tRNAfMet的反密码子环上的是A,tRNAmMet是烷基化腺嘌呤。tRNAfMetTψC环端是A,t

5、RNAmMet的相应位置是G,作用不清。三真核生物蛋白质合成的起始

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