课题计划项目以与可行性实施计划书.doc

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1、课题题目为:琼脂糖自组装膜基底型免疫芯片载体制备及抗体固定研究项目内容摘要:研究意义:为了提升免疫芯片对抗体的固定效率,建立多糖纳米膜基底型芯片载体制备的新方法,为后续免疫芯片的制备提供实验参考和理论支持。研究内容:本文选择多糖中水溶性的琼脂糖为基质,利用分子自组装技术,以玻片为载体,让琼脂糖、高碘酸钠对玻片表面进行修饰,制备琼脂糖自组装膜载体。利用SEM、AFM和FTIR对载体进行表征,获得最佳制备条件;利用荧光显微成像及ImageJ软件,研究该载体对2种不同种属来源抗体的固定效率,对琼脂糖自组装膜载体和普通醛基修饰载体对抗体的固定效果进行对比分析。

2、关键字琼脂糖;免疫芯片;抗体固定项目概况1、主要研究开发内容选择多糖中水溶性的琼脂糖为基质,利用分子自组装技术,以玻片为载体,让琼脂糖、高碘酸钠对玻片表面进行修饰,制备琼脂糖自组装膜载体。利用SEM、AFM和FTIR对载体进行表征,获得最佳制备条件;利用荧光显微成像及ImageJ软件,研究该载体对2种不同种属来源抗体的固定效率,对琼脂糖自组装膜载体和普通醛基修饰载体对抗体的固定效果进行对比分析。材料:琼脂糖、3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTES)(Sigma公司,美国),高碘酸钠、戊二醛、36%冰乙酸、无水乙醇等均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司);

3、FITC标记的驴抗兔抗体(上海生工),FITC标记的兔抗人AFP抗体(上海生工)。器械:超纯水机、电子天平、磁力搅拌器、烘干箱,JSM-6360LV型高低真空扫描电镜,FTS3000FX型的傅立叶变换红外光谱仪,OLYMPUSBX51型倒置荧光显微镜,NanoscopeIIIa型原子力显微镜。基片的预处理:25mm×75mm光学载玻片用氨水洗液(体积比为氨水∶过氧化氢∶水=1∶1∶5)置摇床上振摇2h,取出后用超纯水清洗干净,放入1mol/LHCl中浸泡过夜,再用超纯水超声10min,无水乙醇超声清洗2次,每次5min,置电热恒温箱(120℃)烘烤2h

4、。实验组琼脂糖自组装膜载体制备,对照组进行普通醛基载体制备。基片表面抗体探针的固定,测定观察载体表面荧光探针的固定效率。2、主要技术和经济指标(限1000字)主要技术:琼脂糖自组装膜载体制备①分别配制0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%的琼脂糖溶液,微波炉煮沸3min完全溶解;②将2ml琼脂糖溶液覆盖在60℃预热的清洁玻片上;琼脂糖室温凝固后,置37℃烤箱烘干2h;置室温保存备用;③将上述制备好的琼脂糖玻片置于50mmol/LNaIO4溶液中室温下活化60min。接着用0.1mol/LpH7.4PBS洗涤5min×3次,氮气流吹干。 课题题

5、目为:琼脂糖自组装膜基底型免疫芯片载体制备及抗体固定研究项目内容摘要:研究意义:为了提升免疫芯片对抗体的固定效率,建立多糖纳米膜基底型芯片载体制备的新方法,为后续免疫芯片的制备提供实验参考和理论支持。研究内容:本文选择多糖中水溶性的琼脂糖为基质,利用分子自组装技术,以玻片为载体,让琼脂糖、高碘酸钠对玻片表面进行修饰,制备琼脂糖自组装膜载体。利用SEM、AFM和FTIR对载体进行表征,获得最佳制备条件;利用荧光显微成像及ImageJ软件,研究该载体对2种不同种属来源抗体的固定效率,对琼脂糖自组装膜载体和普通醛基修饰载体对抗体的固定效果进行对比分析。关键字

6、琼脂糖;免疫芯片;抗体固定项目概况1、主要研究开发内容选择多糖中水溶性的琼脂糖为基质,利用分子自组装技术,以玻片为载体,让琼脂糖、高碘酸钠对玻片表面进行修饰,制备琼脂糖自组装膜载体。利用SEM、AFM和FTIR对载体进行表征,获得最佳制备条件;利用荧光显微成像及ImageJ软件,研究该载体对2种不同种属来源抗体的固定效率,对琼脂糖自组装膜载体和普通醛基修饰载体对抗体的固定效果进行对比分析。材料:琼脂糖、3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTES)(Sigma公司,美国),高碘酸钠、戊二醛、36%冰乙酸、无水乙醇等均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司);FIT

7、C标记的驴抗兔抗体(上海生工),FITC标记的兔抗人AFP抗体(上海生工)。器械:超纯水机、电子天平、磁力搅拌器、烘干箱,JSM-6360LV型高低真空扫描电镜,FTS3000FX型的傅立叶变换红外光谱仪,OLYMPUSBX51型倒置荧光显微镜,NanoscopeIIIa型原子力显微镜。基片的预处理:25mm×75mm光学载玻片用氨水洗液(体积比为氨水∶过氧化氢∶水=1∶1∶5)置摇床上振摇2h,取出后用超纯水清洗干净,放入1mol/LHCl中浸泡过夜,再用超纯水超声10min,无水乙醇超声清洗2次,每次5min,置电热恒温箱(120℃)烘烤2h。实验

8、组琼脂糖自组装膜载体制备,对照组进行普通醛基载体制备。基片表面抗体探针的固定,测定观察载体表面

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