玉米杂交种丹玉39和铁单10号鉴别试验.pdf

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1、第3期总第225期农业科技与装备No．3TotalNo．2252013年3月AgriculturalScience&TechnologyandEquipmentMar．2013玉米杂交种丹玉39和铁单1O号鉴别试验高岐(沈阳市农业检测中心，沈阳110034)摘要：为有效区别玉米杂交种丹玉39和铁单10号，利用凝胶电泳技术将不同玉米品种中的蛋白质分成几十条谱带．通过染色显示蛋白质谱带类型。多次重复试验结果表明，盐溶蛋白凝胶电泳法重现性好，结果可靠。关键词：电泳；杂交种；盐溶蛋白；凝胶中图分类号：S188文献标识码：A文章编号：1674—1161(2013)03-0005-02目前，辽

2、宁省种子市场广泛流通的玉米杂交种丹玉39和铁单10号具有相同的母本C8605．因此两者的形态特征差异较小．很难用种子形态鉴定法加以区分。就栽培特性而言。丹玉39抗旱耐涝，对土壤条件要求不严；而铁单10号喜肥水，适宜在肥水条件较好的地块种植。若将两者混淆，很有可能造成减产的后果，给农民带来不应有的经济损失。蛋白质是动物、植物和微生物细胞结构中最重要的成分，是由各种氨基酸组成的高分子。不同玉米品种的蛋白质组成存在差异。即组成蛋白质分子的各种氨基酸排列顺序和数目不同。从而使蛋白质分子所带电荷及分子大小、形状不同。利用凝胶电泳技术将不同玉米品种中的蛋白质分成几十条谱带。通过染色显示蛋白质谱

3、带类型，从而准确地鉴别上述两个品种，为防止经营者将玉米品种铁单10号冒充热销的丹玉39销售提供有力的法律依据。1材料与方法1．1供试品种丹玉39是辽宁东亚种子科学研究院以外引系C8605为母本、自选系丹598为父本组配成的玉米单交种：铁单10号是铁岭市农科院于1988年以C8605为母本、丹340为父本组配而成的玉米单交种。1．2仪器与设备DYY一6B型稳压稳流电泳仪、垂直板夹心式电泳槽、单籽粒粉碎器、离心管(1．5mL)、离心管架、磁力搅拌器、移液管、容量瓶、微量进样器(5～10斗L)。1．3试剂丙烯酰胺、N—N一亚甲基双丙烯酰胺、乳酸、乳收稿日期：2012—12—27作者简介：

4、高岐(1983一)，男，农艺师，从事农产品安全方面的研究。酸钠、甘氨酸、硫酸亚铁、抗坏血酸、蔗糖、氯化钠、甲基绿、无水乙醇、三氯乙酸、考马斯亮蓝、过氧化氢均为分析纯。试验用水均为去离子水。1．4试验方法品种鉴别采用盐溶蛋白凝胶电泳法。分别取5粒丹598、10粒丹玉39、8粒C8605、10粒铁单10号、5粒丹340，粉碎，置于离心管中，按体积比1：1的量加提取液，摇匀，于冰箱内静置1h，备用。按比例量取分离胶和浓缩胶。灌入胶槽制备凝胶。在胶板上按顺序点样，电泳至甲基绿指示剂距离胶板底部边缘0．5～1．0cm处时，卸下胶板，将其立即浸入考马斯亮蓝和三氯乙酸的水溶液中．在30℃恒温条件

5、下染色2～4h，清洗胶板，观察图谱。2结果与分析丹玉39和铁单10号的谱带如图l所示。憾{o—o—-、一．—J—YJL—-、一。一丹59B月玉∞C∞05铁单10号丹340图1丹玉39和铁单10号的特征谱带Fihm'e1CharacteristicspectraofDanyu39andTiedanNo．10丹玉39和铁单10号都是具有互补型谱带的杂交种，两者的识别带均位于B区(主谱带区)。两品种谱带的明显差异是：丹玉39的识别带位于B区中部，在该位置表现为双带，上面一条来自母本C8605，下面一条来自父本丹598。而铁单10号在该位置表现为单带；铁单10号的识别带位于(下转第8页)8

6、农业科技与装备2013年3月套ICP—MS．检测效率会进一步提高．基本满足了当前监管工作的需要。3结论王水消解法能完全提取出土壤中重金属的可交换态、碳酸盐结合态、铁锰氧化物结合态、有机及硫化物结合态等直接和潜在有效态的合量，其测定值与全量法混酸完全消解测定值趋势相同，但对Pb，Cr等元素测定存在显著性差异。恰恰是这种差异排除残渣态等无效态的干扰。较全量法能更加科学地表征土壤污染状况和对农作物的影响。更加符合农业土壤重金属检测研究目的——确定耕种条件下土壤中重金属污染物向农作物的传递。所以。在土壤重金属形态分析方法还难以推广的情况下．王水消解法是目前唯一优选的方法．在一定阶段内应用前

7、景良好。参考文献[1】莫争，王春霞，陈琴，等．重金属Cu，Pb，Zn，Cr,Cd在土壤中的形态分布和转化[J】．农业环境保护，2002，21(1)：9—12．【2】WILLIAMS，D．E．，VLAMISj．，PUKITE，A．H．，eta1．Traceelementaccumulation，movement，anddistributioninthesoilprofilefrommassiveapplicationsofsewagesludge[J1．SoilScie