利用PCR-DGGE方法研究添加复合菌剂对堆肥微生物群落的影响.pdf

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1、农业环境科学学报2011,30(12)：2602—2607JournalofAgro—EnvironmentScience利用PCR—DGGE方法研究添加复合茵剂对堆肥微生物群落的影响王晶，许修宏4(东北农业大学资源与环境学院，哈尔滨150030)摘要：为研究接种复合菌剂对堆肥微生物群落变化的影响，以奶牛粪便和稻草为原料进行堆肥试验，设添加复合菌剂BLD(由3株木质纤维素降解细菌组成，经测序鉴定分别为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、假单胞菌属中未鉴定种)和不加菌剂两个处理，利用传统平板培养与聚合酶链式反应一变性梯度凝胶电泳(PCR—DGGE)方法相结合研究两种堆肥处理对微生物群落演替的影响

2、。结果表明，基于传统培养方式，微生物数量呈升高一降低一升高一降低的趋势，且细菌数量明显大于真菌数量；DGGE图谱显示，两种堆肥处理的条带数呈现与传统培养相似的变化趋势。接种菌株在堆肥初期成功定殖，高温期成为优势菌株，降温期优势逐渐减弱。接种菌剂增加了堆肥中细菌数量，提高了堆肥微生物群落多样性，从而促进堆肥微生物群落演替，缩短堆肥腐熟时间。关键词：堆肥；微生物群落；PCR—DGGE中图分类号：S141．4文献标志码：A文章编号：1672—2043(2011)12—2602-06EffectsofAddingtoComplexBacteriaonMicrobialCommunityofCo

3、mpostAssessedbyPCR-DGGETech-niquesWANGJing，XUXiu-hong’(CollegeofResourcesandEnvironment，NortheastAgricultureUniversity，Harbin150030，China)Abstract：Inordertostudytheinfluenceofinoculatedstrainsoncompostingmicrobialcommunitystrcture．eompostingexperimentWasco帕一ducted，whichusedtheCOWdungandstrawasra

4、wmaterials．Twogroupsweredesigned，bacterialstrainswereaddedtoonegroup(codeannieasBLD，whichwerecomposedofthreekindsofstrains，andsequencingshowedthattheywere且subtilis，B．1icheniformisandPseu-domonas)，theotherwasthecontr01．VariationofmicrobialcommunitiesininoculationandnaturalcompostsWasstudiedwithth

5、etraditionalplate-countmethodandthePCR-DGGEtechnology．Resultsindicatedthat：basedonthetraditionalmethod，thepopulationofmicrobesshowedwave—likefluctuation：up-down—up—down，andthetotalbacterialcountwagsignificantlymorethanfungi．TheDGGEgraphsshowedsimilartrend．Andtheinoculatedstrainscolonizedsuccessf

6、ullyintheearlystageofcompost，theybecamethesuperiorstrainsinthehJishtemperaturephase，thestrengthofbandsreducedinthecoolingandmaturationphases．Inoculatationcouldincreasethetotalcountofbaete-rial，enhancemicrobialdiversityandacceleratemicrobialsuccession，andthenshortenthematurationphase．Keywords：com

7、post；microbialcommunity；PCR-DGGE好氧性高温堆肥是由群落结构演替非常迅速的多个微生物群体共同作用而实现的动态过程。微生物是堆肥过程中最关键、最活跃的因素，向堆料中接种收稿日期：2010—12—20基金项目：科技部十一五科技支撑项目(2008BAD95806—02—04，2008BADAlB01)；哈尔滨市科技攻关计划项目(2007AA6CNl05)；东北农业大学创新团队发展计划项目(CX7I’003—2—1)作者简