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1、成肌细胞论文：P38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用【中文摘要】翼外肌在错(?)畸形的发展及诊疗的各个阶段中起着重要作用,可以受到外环境改变的刺激而发生适应性改建。本研究在成功构建成肌细胞体外培养—力学刺激模型的基础上研究P38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用。方法：本实验将实验细胞分为对照组和抑制剂组。对每组细胞分别施加0小时,6小时,12小时和24小时的周期性张应力。加力设备采用多通道细胞牵张应力加载系统,加力的力值设定为15%,每分钟10循环,每循环包括3s牵张,3s松弛。应用Hoech
2、st33258和光学显微镜检测细胞凋亡的形态学变化；RT-PCR和流式细胞术检测细胞凋亡情况；WesternBlot检测信号通路中P38MAPK蛋白P-P38MAPK蛋白的表达变化情况。实验结果应用SPSS17.0软件分析处理。结果：光学显微镜可见持续张应力的作用下,骨骼肌成肌细胞发生不同程度的凋亡。Hoechst33258检测观察到细胞受力后细胞核固缩并出现凋亡小体。RT-PCR和流式细胞术结果显示随加力时间的延长细胞凋亡率增加(P<0.05),抑制剂SB203580组的凋亡率明显小于对照组,且P38MAPK蛋白和P-P3
3、8MAPK蛋白的表达均受明显影响(P<0.05)。结论：1.周期性张应力可以明显诱导细胞凋亡,随加力时间的延长,细胞凋亡率明显增加。2.P38MAPK蛋白、P-P38MAPK蛋白的表达在加力6h降到最低点,之后随加力时间的延长蛋白表达量随之增多。3.加入特异性抑制剂SB203580后细胞的凋亡率明显受到抑制,P38MAPK蛋白、P-P38MAPK蛋白的表达量在加力6h后表达量最低,之后随加力时间的延长蛋白表达量随之增多。4.P38MAPK信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中起到重要的调控作用。【英文摘要】AimExternal
4、pterygoidmuscleplaysanimportantroleinthedevelopmentofdentfacialdeformity.Itcanbeadaptedtothestimulioftheenvironment.Thereconstructionofexternalpterygoidmuscleisindispensablebycellularproliferation,differentiationandapoptosis.Successfulconstructsmusclecellsinvitrome
5、chanicalstimulationmodelsbasedonresearchonitsP38MAPKsignalingpathwaysofapoptosisfunction.MethodologyThecellsweredividedincontrolgroupandSB203580treatmentgroup.CyclictensilestresswasappliedontheC2C12myoblastcellsforOh,6h,12hand24hineachgroup.Thecellsweregivenamultic
6、hannelcelltensilestressloader.Thestretchcells’svaluegroupis15%,10cycle/min.Andthatwastosayeachcycleincluding3-sstretch/3-srelaxation.Hoechst33258fluorescentstainingandopticalmicroscopewereusedtodetectcellapoptosis.Hoechst33258fluorescentstainingandopticalmicroscope
7、wereusedtodetectcellapoptosis.RT-PCR,flowcytometricanalysiswereusedtoobservetheapoptosisofC2C12myoblastcellandWesternblottingwereusedtodetecttheactivityofP38MAPKandphosphor-p38MAPK.WeusedSPSS17.0StatisticalPackagetoanalyzethedata.ResultTheopticalmicroscopetestedthe
8、changeinthemorphology.Hoechst33258stainingshowedthataftertreatmentwithcyclicstress,thecelltookthetypicalappearanceofapoptosiswithchromatincondens
