高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯.pdf

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1、第40卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报第12期2012年12月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1902～1906DOI：10．3724／SP．J．1096．2012．20610高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯于瑞祥杨瑞钰张欣方晓明丁卓平(上海海洋大学食品学院，上海201306)(上海市标准化研究院，上海200031)(上海出入境检验检疫局，上海200135)摘要建立了高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯的方法。样品用石油醚提取，硅胶柱净化，反相C，0柱(250mmX4．6mmi．d，5m)分离，乙腈一叔

2、丁基甲醚(75：25，V／V)作流动相，等度洗脱，紫外检测(235nm)。结果表明：4种甾醇烯的质量浓度在0．0251．0mg／L范围内；峰面积与质量浓度呈良好的线性关系，线性相关系数r>0．999。在加标水平为0．050，0．10和0．50mg／kg时，4种甾醇烯的加标平均回收率为89．2％～109．8％；相对标准偏差RSD~8％；方法检出限(LOD)为0．010mg／kg。本方法已应用于实际样品分析。关键词高效液相色谱；甾醇烯；植物油1引言在脱色、水蒸汽洗涤以及除臭等精炼过程中，油脂中的甾醇易发生脱水反应，产生烯键，形成具有共轭双键的甾醇烯类物质(Sterad

3、ienes)。在植物油精练过程中，以谷甾醇(／3-Sitostero1)脱水产生的3，5一豆甾二烯含量最为丰富，其次为3,5一菜甾二烯(Campesta-3，5一diene)和3，5，22一豆甾三烯(Stigmasta-3，5，22～triene)。它们分别由菜甾醇(Campestero1)和豆甾醇(Stigmastero1)脱水生成。3．5一胆甾二烯(Cholesta-3,5-diene)是由胆固醇(Cholestero1)脱水形成，通常只存在于动物性油脂中，在植物油中含量非常低。4种甾醇烯的化学结构式见图1。检测4种甾醇烯的方法多采用气相色谱法，也有少数研究采

4、用液相色谱】，主要是因为4种物质的结构相3,5一胆甾二烯3,5．菜甾二烯似。液相色谱的保留时间非常接近，不能够完全达到基线Cholesta一3，5一dieneCampesta-3，5一diene分离。本研究采用高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯。样品前处理方法在文献[3，5]基础上加以改进，采用反相C。柱分离，乙腈一叔丁基甲醚(75：25，V／V)作流动相3,5-豆甾二烯3,5，22．强甾三烯等度洗脱，获得基线分离，在235am进行紫外检测，检出限Stigmasts-3-5，dieneStigmasta一3，5，22-trie达到0．010mg／kg，比文献

5、[6，7]的方法灵敏。本方法快速、灵图14种甾醇烯的化学结构式敏、可靠，已应用于实际样品分析。Fig．1Chemicalstructureofsteradienes2实验部分2．1仪器与试剂2695高效液相色谱系统(Waters公司)，配2487紫外检测器，Empowerpro色谱分析软件。N-EVAPIII恒温氮吹仪(OrganomationAssociates公司)，涡旋混合器。硅胶柱(30cmX15n-lmi．d．)：加15g硅胶，顶端加0．5cm无水Na2SO4。石油醚(色谱纯，沸程35～60℃，Caledon公司)；乙腈(色谱纯，Caledon公司)；正

6、己烷(色谱纯，J．T．Baker公司)；叔丁基甲醚(色谱纯，Sigma公司)；无水Na：SO(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)：2012-06-14收稿；2012-07-12接受本文系国家质检总局科研项目(No．2012IK184)、上海市教育委员会重点学科建设项目(No．J50704)资助E-mail：fangxm@shciq．gov．cn；zpding@shou．edu．ca第12期于瑞祥等：高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯1903于500℃烘4h以上，冷却后储存于干燥器中备用；硅胶60(0．0630．200mm，Merck公司)：于450℃烘5h以

7、上，冷却后加入2％水，混匀，转移至广口试剂瓶中，盖塞备用；水为超纯水。甾醇烯类标准品：3，5一胆甾二烯标准溶液100mg／L，纯度>99．0％；100mg／L3，5一菜甾二烯一3，5一豆甾二烯混合溶液(19：81，v／v，纯度>99．0％)和3，5，22-豆甾三烯标准溶液100mg／L(纯度>99．0％)均购自挪威ChironAS公司。进口植物油由上海出入境检验检疫局提供；国产植物油购自超市；地沟油样品由上海食品药品监督所提供。2．2实验方法2．2．1样品处理称取植物油样品2．0g(精确至0．01g)于烧杯中，加入5mL石油醚，混匀，倒人硅胶柱中，用5mL石油醚润

8、洗烧杯2次