《luminex原理应用》PPT课件.ppt

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1、多功能液相芯片分析系统（Luminex技术）常见的细胞因子检测方法ELISAELISpot免疫学功能研究缺点：一次实验只能检测一种细胞因子PCR原位杂交流式细胞术胞内染色缺点：一次实验检测的细胞因子种类有限；不能定量多功能液相芯片分析系统的优势同时检测几种甚至十种以上细胞因子快速鉴定Th1/Th2特异性免疫应答需要的样本量少（50ul；血清、血浆、培养上清等）节省时间和经费Luminex技术原理和优势Luminex技术应用Luminex相关试剂盒产品主要内容Luminex技术是在有色微球、激光技术、应用流体学及高速数字信号处理技术的基础上发展起来的一种多功能的液

2、相分析平台。基本概念基本原理捕获分子待测分子报告分子捕获微球聚苯乙烯材料，大小均一，直径5.6um标记了两种荧光染料，每种染料的浓度有10个梯度，通过调整两种染料的比例可以获得100种不同染色的微球标记了针对检测物的捕获分子作为探针每种微球的地址由两种红色荧光颜料的掺入比例唯一决定颜色编码的微球荧光微球红色染料浓度逐渐增大紫色染色浓度逐渐增大捕获抗体-抗原-检测抗体夹心复合物捕获微球的检测原理检测原理样本检测区红光用于鉴定微球绿光用于检测荧光信号的强弱检测原理在一个反应体系内测定多个指标检测原理检测原理高通量检测：可对同一样本中的多种不同目的分子同时进行分析在3

3、5-60分钟内可对96个不同样本进行检测。灵活性，可以随意组合检测指标多元分析，操作简便，可以节约试剂、时间和精力灵敏度高，重复性好所用标本量少，尤其适合分析稀有样本液相反应动力学，更快地达到平衡点，缩短实验时间Luminex的技术优势Luminex™技术与固相芯片重复性好，敏感性高灵活性好特异性高：因为只读微粒上的信号。检测迅速:液相悬浮杂交比固相扩散杂交快。价格低：设备和试剂的价格都低于芯片。成熟的技术：不需要进一步投入做产品研发。Luminex技术与ELISA方法高通量检测：用微量标本进行多个指标检测比ELISA的灵敏度高100-10000倍重复性好操作简

4、便、省时省力液相芯片的应用免疫学分析细胞因子检测受体－配体分析酶分析蛋白质－蛋白质相互作用分析蛋白质－DNA相互作用分子核酸研究SNP检测基因表达谱分析Luminex检测体系的组成Luminex仪器Luminex检测试剂Luminex试剂盒Luminex附件Luminex检测配套试剂盒R&D:FluorokineMAP系列，主要检测各种细胞因子及MMP系列蛋白Biosource：各种细胞因子、生长因子系列Upstate:Beadlyte系列，主要检测细胞因子/趋化因子、信号转导相关蛋白及激酶的活性Linco：各种细胞因子和趋化因子检测Cayman：检测前列腺素E

5、2R&D配套Luminex试剂盒humanIFN-ghumanIL-2humanIL-4humanIL-5humanIL-6humanIL-10humanIL-17humanTNF-ahumanTNF-HumanCCL系列HumanVEGFmouseGM-CSFmouseCCL2mouseIFN-gmouseIL-1mouseIL-2mouseIL-4mouseIL-5mouseIL-6mouseIL-10mouseTNF-amouseVEGFBiosource配套试剂盒Human/MouseTh1/Th2CytokinesHuman/MouseChemok

6、inesHuman/MouseInflammatoryCytokinesHuman/MouseGrowthFactorLinco配套试剂盒人/小鼠/大鼠Cytokine/Chemokine疾病相关研究试剂盒：内分泌（糖尿病、肥胖病、垂体激素等）脂肪组织分泌代谢心血管疾病皮肤疾病细胞代谢骨代谢等Upstate配套试剂盒各种总/磷酸化的信号转导蛋白Human/Mouse/RatCytokinesHuman/MouseChemokinesHumanGrowthfactor