微生物实验培养基配方.doc

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1、微生物学实验常用培养基的配制1、牛肉膏蛋白腺培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白腺5g氯化钠10g琼脂15~20gpH7.0~7・2水lOOOmL1219灭菌20mino2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾lg氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁O.Olg琼脂20g水lOOOmLpH7.2〜7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入点沸的水屮,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至lOOOmLo121°C灭菌20min。3、査氏(Czapek)

2、培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾lg氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁O.Olg蔗糖30g琼脂15~20g水lOOOmLpH白然121°C灭菌20min°4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)窗萄糖10g蛋白豚5g磷酸二氢钾lg七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rosebengal,玫瑰红水溶液)lOOmL琼脂15—20gpH自然蒸懈水800mL112°C火菌BOmino临用前加入0.03%链霉素稀释液lOOml.,使每毫升培养基屮含链霧素30ugo5、马铃薯培养基(简称PDA)(

3、培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或匍萄糖)20g琼脂15—20gpH白然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至lOOOmLo121°C灭菌30mino6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6-12小时,至15°C阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每口早、屮、晩淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65°C水浴屮糖化3-4小时,糖化稈度可用碘滴定之。加水约

4、20汕,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液屮搅拌煮沸后再过滤。(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋H加水约20讥,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液屮搅拌煮沸后再过滤。(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。12VC灭菌30mino7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)甘露醇(或葡萄糖)10g磷酸二氢钾0.2g七水合硫酸镁0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馅水lOOOmLpH7.0—7.2113°C灭菌30min<>8、

5、半固体肉膏蛋白腺培养基肉膏蛋H豚液体培养基100mL琼脂0.35—0.4gpH7.6121°C灭菌20mino9、合成培养基偏磷酸饺氯化钾0.2g七水合硫酸镁0.2g豆芽汁lOmL琼脂20g蒸催水lOOOmLpH7.0加12汕0.04%的漠钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。121°C灭菌20min。10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽100g蔗糖(或徜萄糖)50g水lOOOmLpH白然培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水lOOOmL,煮沸约30min,用纱布过滤。用水补足

6、原最,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。121°C灭菌20min。11、油脂培养基蛋白腺10g牛肉膏5g氯化钠5g香油或花生油10g1.6%屮性红水溶液ImL琼脂15—20g蒸催水lOOOmLpH7.2121°C灭菌20min注:⑴、不能使用变质油。(2)、油和琼脂及水先加热。(3)、调好pH值后,再加入中性红。(4)、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基屮。12、淀粉培养基蛋白腺10g牛肉膏5g氯化钠5g可溶性淀粉2g蒸镉水lOOOmL琼脂15—20g121°C灭菌20min13、明胶培养基牛肉膏蛋

7、片腺液100mL明胶12—18gpH7.6在水浴锅屮将上述成分溶化,不断搅拌。溶化后调PH7.2—7.4。121°C火菌30mino14、蛋白陈水培养基蛋白腺10g氯化钠5g蒸锢水lOOOmLpH7.6121°C火菌20mino15、糖发酵培养基蛋白豚水培养基lOOOmL1.6%漠钾酚紫乙醇溶液1—2mLpH7.6另配制20%糖溶液(窗萄糖、乳糖、蔗糖等)lOmLo培养基的配制:(1)、将上述含指示剂的蛋H脓水培养基5117.6)分装于试管屮,在每管内放一倒置的小玻璃管(Durhamtube),使之充满培养液。

8、(2)、将己分装好的蛋白助冰和20%的各种糖溶液分别火菌,蛋白肋冰121°C灭菌20min;糖溶液112°C灭菌30mino(3)、灭菌丿乙每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5mL(按每10mL培养基屮加入20%的糖液0.5mL,则成1%的浓度)。配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。16、葡萄糖蛋白腺水培养基蛋白豚5g超糖糖5g磷酸氢二钾2g蒸馆水lOOOmL将上述各成分溶于

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