植物磷素的测定.docx

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1、实验三植物磷素的测定(钼蓝法)一、实验目的：1、掌握常用的钼蓝测磷法；2、练习使用分光光度计。二、实验原理：   在酸性条件下,无机磷可与钼酸铵作用生成磷钼酸铵,并被氯化亚锡还原成蓝色的磷钼蓝，由蓝色的深浅即可测定磷的含量。H3PO4+12(NH4)MoO4+21HCl      (NH4)3PO4·12MoO3+21NH4Cl+12H2O                                   磷钼酸铵(NH4)3PO4·12MoO3      (MoO2·4MoO3)2·H3PO4·4H2O钼蓝的最大吸收波长为660nm.三、实验仪器与试剂：1、实

2、验仪器：分光光度计 研钵等2、试剂:50µg/ml标准磷溶液3、材料:菠菜、青菜、菜花 四、实验内容： 1、绘制标准曲线。   取标准磷溶液分别配成浓度为0、2、4、6、8、10、15、20µg/ml磷溶液10mL，各取1mL于试管中，加入7mL水，再加入钼酸铵硫酸试剂3mL，摇匀，再加SnCl20.1mL，混匀，静置10-15min。   选择660nm波长，用光径1cm比色杯，以浓度0为参比溶液，测得各标准溶液的光密度。以磷浓度为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线。2、磷含量的测定取青菜叶2g于研钵中，加少许石英砂及2mL水研磨。将匀浆移至25mL容量瓶中，

3、将研钵中残渣一并洗入，然后加水至刻度。取该混合液于7000r/min条件下离心15min，取组织提取液1mL，如上步骤，测其光密度，由公式计算磷含量：P(µg/g叶鲜重)=C×(V/W)  式中：C为提取液的磷含量（µg/ml）；        V为提取液的体积（mL）；        W为样品鲜重（g）。五、实验结果1、标准曲线  编号 0      1      2      3      4      5      6      7  浓度（ml）吸光度值0      06    0.8     1.0     1.5    2.0    2.5     3

4、.00     0.168  0.221   0.285   0.420  0.565  0.680   0.825  方程为：y=0.2741x+0.0048               R2=0.99942、实验数据材料数据1数据2代入曲线求X菠菜0.5800.5021.956 3、结果计算菠菜：P=2.09*25/2=24.453µg/g六、分析与讨论我们组测得结果还不是很好，每次测量时，吸光值都不是很稳定。我想可能有以下的原因：可能菠菜不适合用该方法测量磷素含量，别的组结果就较好；我们组在加完氯化锡静置时，试管中出现大量的絮状物，以致最后吸光值测得不准确，

5、有的根本无法测量。七、注意事项：1、使用钼蓝测磷法时，钼蓝铵-硫酸溶液应用滴定管加入，体积要准确，否则会因酸度不合适而导致不显色。2、显色时间不宜过长，蓝色易褪去。3、实验中洗手池易着色，实验完毕，应及时用盐酸-乙醇（1:2）洗涤剂浸泡，再用水清洗。  批阅老师:黄爱霞评    分:A批    语:标注曲线好，结果可靠