禽流感防治技术的研究现状.doc

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1、禽流感防治技术的研究现状禽流感防治技术的研究现状禽流感(Avainin-fluenza.AI)是南禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)引起的禽类的一种从呼吸系统到严重全身败血病症等多种症状的传染性疾病综合病。鸡、火鸡、鸭等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均町感染•A型ATV可分为高致病性(HPAT)、低致病性(LPAI)和非致病性(NPAT)三大类。HPAI因其传播快、危害大.被世界动物卫纶组织定为A类传染病。AIV曲8股RNA节段构成，分别编码10种结构蛋白。根拯外膜皿凝素(HA)抗原和神经氨酸酶(NA)的不同，冃前町分为15个H亚型和9个N亚型，任

2、何一种IIA与任何一种NA结合后即为一种血清亚型。1禽流感的预防国内外ATV的防治实践表明，疫百免疫是防止ATV暴发和造成巨人损失的主要措施、关键环节和最后防线。当前理想的疫苗应该具备以下特点：①寻找新方法來代替在蛋内制备禽流感疫苗的方法；②采用群体免疫接种法；③确保疫苗在存在母源抗体和循坏抗体时依然有效；④识别接种疫苗的个体与自然感染的个体；⑤能対病毒的遗传变化作出迅速反应；⑥疫苗牛:产时対工作人员和环境安全。1.1全病毒灭活苗该疫苗是用甲醛火活鸡胚增殖ATV的尿囊液辅以佐利制成的油乳剂疫苗，町预防同-•血凝索类型病毒引起的发病死亡。用以制造全病毒抗原A【V灭活疫苗

3、的病毒株通常为具有相同H抗原的低致病性或无致病性壽株。因同源全病壽禽流感灭活疫苗的制苗毒株为天然野毒分离株，多属高致病性毒株，在制备灭活苗时对生产没施的牛物安全耍求极其严格。而月•其牛产、使用过程极易散毒，月•无法区分免疫动物与野外自然感染动物，我国尚未批准牛:产II5N1亚型流行毒株全病毒灭活疫苗。用低致病性或儿致病性毒株制备AIV火活疫苗对制苗过程中生物安全方面的要求标准较低，而口这种抗原制备灭活苗还能够成功保护禽群免受相同H亚型病毒的感染。如用H5亚型的低致病性或无致病性AIV制备的的灭活疫苗，叮川于预防115亚型的高致病性AIV造成的感染。由于灭活疫苗屮II抗

4、原含量是疫苗免疫效果的决定性因素。Schild等发明的SRD试验是测定AI灭活苗中II抗原含量的标准方法。目前，应用的禽流感常规疫苗主要是灭活苗，但是这种疫苗的制造方法、免疫程序、免疫效果的可靠性以及大而积应用的可行性、安全性等，均存在不少缺点，而且其生产时需川鸡胚扩增AIU,需耍高生物安全的制苗条件，制苗成木较高。免疫保护期短，需反复接种。并冃不同亚型间不能产生交叉保护，免疫剂量大。因灭活苗使用矿物油佐剂，易引起接种部位局部组织炎性损伤和坏死，造成肉品桂类化合物污染，影响肉品品质151。随着分子生物学的发展，人们对AIV分子结构、免疫原性及抗原变异的分子基础都冇了较

5、深入的认识，并随着对AIV分子牛物学特性的了解及深入，相应地开发了一些更加安全冇效的疫苗。1.2基因工程苗应川重组DNA的生物技术，通过酶的作丿IJ,在体外进行基因的剪切，并将重组的DNA转化到新的细胞中去重新表达的操作过程称为基因工程或遗传工程。1.2.1基因工程禽流感灭活疫苗基因工程AIV灭活疫苗是通过流感病毒的反向基因操作技术，先将流行于某一地区的高致病性禽流感莓株的基因组中决定ATV高致病性的相关核酸序列人工缺失，再与其他流感病毒株进行反向基因操作，使新的流感犧株在保持与流行地区高致病性禽流感病毒具有相同保护性抗体原的同时，毒力大人降低并可作为疫苗种子毒而用來

6、制备灭活疫苗。农业部动物流感开放实验宝和国家AI参考实验空采川此项技术，研制出新型高效重组AIVH5N1亚型灭活疫苗。与全病毒灭活疫苗相比，鸡胚生长滴度高，对禽类和u甫乳动物高度安全，抗原针对性强，使用方便。该疫苗已经成为我国冃前禽流感防控的首选疫苗。1.2.2亚单位疫苗亚单位疫苗是提収ATV的保护性抗原成分如HA等辅以佐剂制成。这种疫苗安全性好。能刺激机体产生足够的免疫力，但免疫保护持续期短，几制造成本高。近年來，人们用重组DNA及分子克降技术将HA基因连接到载体质粒上，然后导入表达系统中进行扩增和表达,获得大量的HA蛋白。用这种方式生产的HA蛋白不仅产量高，而且易

7、于纯化，因而具有良好的开发和应用前景。1994年Robinson等报道了ATVHA基因表达质粒直接导入机体，可诱导鸡对攻毒的免疫保护。美国蛋白质科学冇限公司Bethanic和W订kinson等利用重组杆状病毒表达系统生产H5、H7的含佐剂HA亚单位疫苗，对诱导鸡产生对抗致死性AIV攻击的保护力。台湾谢快乐等川台湾分离株H8N4的血凝索IIA和神经胺酸酶NA制作了免疫复合物亚单位疫苗，同时制作了II8N4的火活油佐剂苗，在加强免疫时亚单位疫苗抗体升高比灭活疫苗明显。由于该疫苗易于规模化生产，而冃经济方便，因此，前景比较乐观。1.2.3重组活载体疫苗利用