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时间:2020-03-17
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1、……………………装…………………订…………………线……………………内……………………不…………………准…………………答……………………题………………………姓名____________班级____________学号___________ 编号选修16扬中树人2012-2013-1高二年级生物导学案(选修)2012-12-2动物细胞工程命题:王丽校对:宋华完成时间:30分钟【学习目标】1.简述动物细胞的培养过程2.关注克隆技术的伦理问题【自学质疑】一、动物细胞工程一般包括动物细胞与组织培养、细胞核移植、体细胞克隆、细胞融合、单克隆抗体制备等技术。二、动物细胞与
2、组织培养1、动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。动物细胞培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。动物细胞培养液的特点:液体培养基、含动物血清(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。(2)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?因为这些组
3、织或器官上的细胞生命力,分裂能力。动物组织或细胞培养的难易程度:幼体组织或细胞>老龄组织或细胞分化程度低的组织或细胞>分化程度高的组织或细胞分化程度低的组织或细胞>分化程度高的组织或细胞细胞株☆03.概念:原代培养:将动物组织用胰蛋白酶处理成单个细胞,配制成一定浓度的悬浮液,放入培养瓶中在培养箱中培养的过程传代培养:培养瓶中的细胞越来越多,用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来,配制成悬浮液,分瓶培养的过程细胞株:原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去,细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞能存活传到40~50代,这部分细胞称为细胞株细胞系:细胞株传到50
4、左右不能再继续传代,部分细胞遗传物质改变,具有癌变细胞的特点,可以在培养条件下无限制的传代下去,这部分细胞称为细胞系补充:细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁(培养瓶中的悬浮液细胞,紧贴培养瓶内壁才能生长)。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。(4)动物细胞培养需要满足以下条件第6页共6页①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培
5、养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清等天然成分。③温度:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。④气体环境:95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。(5)动物细胞培养技术的应用:①生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。②利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点,可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞,以供植皮所需。③培养的动物细胞用于检测有毒物质,判断物质的毒性。植物组织培养和动物细胞培养的比较项目主要原理培养基结果培养目的植物组
6、织培养细胞全能性固体:营养物质、激素培育成植株快速繁殖培育无病毒植株动物细胞培养细胞增殖液体:营养物质、动物血清培育成细胞株或细胞系获得细胞或细胞产品等例1、为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液,选取的动物组织应选用下列哪种物质处理A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.盐酸D.胰脂肪酶[解析]在动物组织细胞的间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,它们将细胞网络起来形成具有一定的弹性和韧性的组织和器官,而弹性纤维易被胰蛋白酶在中性略偏碱性环境下催化分解,而胃蛋白酶在pH为1.8左右催化效率最高,此环境下的动物细胞会被破坏。[答案]B例2、下列有关
7、动物细胞培养的叙述中正确的是()A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株例3:如图所示是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答。(1)动物细胞培养的原理是。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是剪碎,然后用酶处理,其目的是。(3)培养先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和等。在此瓶中培养一段时间后,一般传到第10代,有许多细胞衰老死亡,到这时的培养称为。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中
8、,用处理,然后配置成,再分装。第6页共
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