洁净室(区)沉降菌测试操作规程.doc

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1、此文档收集于网络，如有侵权，请联系网站删除洁净室（区）沉降菌测试操作规程1目的建立一个洁净区（室）沉降菌检测的标准操作程序，保证洁净区微生物检测按规范执行。2范围公司所有洁净区（室）的沉降菌测定和环境的验证。3责任者质量技术部对本SOP实施负责。4程序4.1本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区（室）的洁净度。4.2所用的仪器和设备4.2.1高压蒸汽灭菌器使用时应严格按照“高压蒸汽灭菌器操作规程”和说明书

2、操作。4.2.2恒温培养箱必须定期对培养箱的温度计进行检定。4.2.3培养皿采用Φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。4.2.4培养基4.2.4.1普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。4.2.4.2培养基的准备及灭菌4.2.4.2.1将Φ90mm的培养皿置于121℃湿热灭菌20min或180℃干热灭菌2h。4.2.4.2.2将培养基加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。4.2.4.2.3等琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于30℃-35℃恒温培养箱中培养48h，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。制备好的培养基平皿宜在2

3、℃-8℃的环境中存放。4.3测试步骤4.3.1采样方法此文档仅供学习与交流此文档收集于网络，如有侵权，请联系网站删除将已制备好的培养皿按5.4.1.2的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。4.3.2培养4.3.2.1全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。4.3.2.2在36℃±1培养箱中培养，时间不少于48h。4.3.2.3每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。4.3.3菌落计数4.3.3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检查，有否遗漏。4.3

4、.3.2若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。5注意事项5.1测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。5.2采取一切措施防止人为对样本的污染。5.3对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。5.4由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。5.5采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。6测试规则6.1测试状态6.1.1沉降菌测试前，被测试洁净区（室）的温湿度须达到规定的要求，静压

5、差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。6.1.2沉降菌测试前，被测试洁净区（室）已经过消毒。6.1.3测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。6.2测试人员6.2.1测试人同必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。6.2.2静态测试时，室内测试人员不得多于二人。此文档仅供学习与交流此文档收集于网络，如有侵权，请联系网站删除6.3测试时间6.3.1对单向流，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。6.3.2对非单向流，如10000级、100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系

6、统正常运行不少于30min后开始。6.4沉降菌计数6.4.1采样点数目及其布置6.4.1.1最少采样点数目沉降法的最少采样点数可按表1确定。表1最少采样点数目面积m2洁净度级别100100,000<10≥~<20≥~<40≥40~<100≥100~<200≥200~<400≥400~<1000≥1000~<200020002~348164080160400800222236133263注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对于非单向流洁净室，指的是房间面积。在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见表2。表2最少培养皿数洁净度级别所需Φ90mm的培

7、养皿数（以沉降0.5h计）10010000100,0001422此文档仅供学习与交流此文档收集于网络，如有侵权，请联系网站删除6.4.1.2采样点的布置6.4.1.2.1工作区采样点的位置离地0.8m~1.5m左右(略高于工作面)。6.4.1.2.2可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。6.4.1.2.3采样点位置的详细规则见附图。6.5记录测试报告中应记录房间温度、相对湿度、压差及测试状态。测试报告的编写见附表。6.6结果6.6.1用计数方法得出各个培养皿的菌落数。6.6.2平均菌落数的计算，见下式。式中：M为平均菌落数M1为1号培养皿菌落数M2为2号培