实验六 果蝇的观察及饲养.ppt

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1、实验四  果蝇的性状观察与饲养管理生命科学学院了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管理的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。一、实验目的二、实验原理普通果蝇（Drosophilamelanogaster）为双翅目昆虫，具完全变态。用果蝇做实验材料有许多优点：1.生长迅速，每12天左右即可完成一个世代；2.繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右，因此在短时间内即可获得大量的子代,便于遗传分析；3.饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；4.突变性状多达400以上,且多数是形态变异,容易观察。三、实验材料野生型果蝇(灰身、红眼、长翅、直

2、刚毛)及几种常见的突变型：如白眼、小翅、卷刚毛、黑檀体等。四、实验器具和药品试剂生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、镊子、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉签、滤纸。乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。五、实验内容和步骤（一）生活史的观察果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段。图1果蝇生活史卵：卵白色，长椭圆形，长约0.5mm，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期,体长可达4-5mm。在解剖镜

3、下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。蛹：幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色,这就显示即将羽化了。成虫：刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深,如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。图1果蝇生活史1.

4、卵2.一龄幼虫3.二龄幼虫4.三龄幼虫5.蛹6.成虫(雄)7.成虫(雌)果蝇生活周期的长短与温度关系密切，30℃以上时果蝇则将不育并可导致死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是20-25℃。10℃15℃20℃25℃卵→幼虫→蛹→成虫57天18天15天12天用手轻拍果蝇的培养瓶，使果蝇震落瓶底，迅速拔去棉塞，并将麻醉瓶与培养瓶的两口相对，培养瓶在下、麻醉瓶在上，并朝向灯光处，双手遮住培养瓶，利用果蝇的趋光性和向上性，将果蝇引入麻醉瓶；先在棉签上滴上数滴乙醚，将培养瓶口朝下，果蝇即向上爬行。轻抽出棉塞，插进棉签，

5、将棉塞塞住，平放在桌面上约半分钟，果蝇即被麻醉。（二）果蝇麻醉注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡；摇动麻醉瓶，使果蝇震落瓶底，之后立即将果蝇倒白瓷板或滤纸上，用毛笔小心拨动观察；检查后的果蝇可以放回原培养瓶中，也可以进行处死。（三）果蝇雌雄性别的鉴别果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易区别：1.体型：雌果蝇体型较大，雄果蝇较小；2.腹部末端：雄性腹部钝圆，雌性末端末端稍尖；3.腹部背面：雌性有明显5条黑色条纹，雄性有7条，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。4.腹部腹面：雌性有较

6、明显的7个腹片，雄性有5个腹片。5.性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。图3左：雄性果蝇的左前足中：跗节基部的性梳右：雌果蝇无性梳C、基节TR、转节F、腿节TI、胫节TA、跗节（四）果蝇培养基果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为食，而是采食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。配方水/ml琼脂/g蔗糖/g玉米粉/g丙酸/ml酵母粉/g1801.513100.50.52100110100.50.5按配方称量各成分；用2/3的水将琼脂

7、调匀，加热熔化；加入蔗糖使溶解；用1/3的水将玉米粉调成糊状，倒入上液中，不断搅拌，煮沸至粘稠为止；为防止培养基长霉，可加2ml丙酸或苯甲酸搅拌均匀将培养基倒入灭菌的培养瓶中；用棉塞封口，使冷却凝固；用前1-2天，在培养基表面撒少量干酵母粉，使培养基发酵后即可使用。实验室常用的培养基配制方法是：（五）几种常见的突变性状实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一些则可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显而稳定的。作业：1.如何区分果蝇的雌雄个体？2.果蝇麻醉是的注意事项有哪些？