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时间:2020-03-14
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1、高中生物实验总结【必修一】实验一物质鉴定【课本P18-P19】还原糖+斐林试剂砖红色沉淀脂肪+苏丹III/苏丹IV橘黄色/红色蛋白质+双缩脲试剂紫色反应1、还原糖的检测(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。不能选西瓜!!鉴定的糖是还原性糖,因此不能用甘蔗作为实验材料!!若鉴定材料中不含还原性糖,则实验结果应该为蓝色,而不是无色!!(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用,本质是Cu(OH)2(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和
2、乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)2、脂肪的检测(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。(2)步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)3、蛋白质的检测(1)选材:豆浆或者蛋清(蛋清必须稀释,以避免蛋清粘附在试管壁上,不易清洗)(2)试剂:双缩脲试剂(A液:
3、0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)(3)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)(4)实验原理:Cu2+碱性条件下与肽键发生络合反应,生成紫色络合物。(故加热导致蛋白质空间结构发生改变引发的蛋白质变性之后,蛋白质中的肽键仍能与双缩脲试剂发生紫色反应)实验扩展:将蛋白质与蛋白质酶混合使其充分反应过后,再加入双缩脲试剂进行鉴定,仍能够发生紫色络合反应;将蛋白质+蛋白质酶+多肽酶混合反应后,加入双缩脲试剂,实验结果依然是紫色。原因:蛋白质被蛋白酶和多肽酶分解成氨基酸,
4、蛋白酶和肽酶与双缩脲试剂反应考点提示:1(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。(2)还原性糖植物组织取材条件?含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。(3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用?混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。(5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为:浅蓝色棕色
5、砖红色(6)花生种子切片为何要薄?只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。(7)转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?切片的厚薄不均匀。(8)脂肪鉴定中乙醇作用?洗去浮色。(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化?不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。实验二观察DNA和RNA在细胞中的分布【课本P26】实验材料:人的口腔上皮细胞;试剂:甲基绿、吡罗红混合染色剂(对DNA和RNA的亲和力不同)(真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内
6、也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中)8%盐酸的作用:①增加细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;②使DNA和蛋白质分开,便于DNA与染色剂结合步骤:1、制片(要烘干)2、水解(8%盐酸5分钟)3、冲洗(蒸馏水)4、染色实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色。实验三细胞膜的提取实验【课本P40】材料:哺乳动物的成熟红细胞(原因:哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核和众多的细胞器)处理方法:将红细胞稀释液置于蒸馏水中使其破裂,释放出内容物实验四观察叶绿体和细胞质流动【课本P47】1、材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片原理:叶绿体在显微镜下观察,
7、绿色,球形或椭球形。2、材料:人的口腔上皮细胞试剂:健那绿试剂(活细胞染料)(染成蓝绿色),将0.5g健那绿溶于生理盐水,加温到30℃~40℃,使其充分分解2结果:用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。细胞活性:实验过程中细胞保持活性,故而在制作装片的过程中,须滴加生理盐水(等渗溶液),不能滴加蒸馏水知识概要:取材制片低倍观察高倍观察考点提示:(1)为什么可直接取用藓类的小叶,而不能直接取用菠菜叶?因为藓类的小叶很薄,只有一层细胞组成,而菠菜叶由很多层细胞构成。(2)取用菠菜叶的下表皮时,为何要稍带些叶肉?表皮细胞除保卫细胞外,一般
8、不含叶绿体,而叶肉细胞含较多的叶绿体。
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