选修3(人教版)1.2基因工程操作的基本步骤.doc

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1、专题11.2基因工程的基本操作程序课前预习案一、预习目标简述基因工程原理及基本操作程序。二、预习内容1.基因工程的基本操作程序主要包括哪四个步骤？2.目的基因主要是指什么，也可以是什么？目前常用的获取目的基因的方法有哪三种？3.什么是基因文库？有哪几种？如何区分？4.从基因文库中获取目的基因的依据有哪些？（找出5条）5.利用PCR技术扩增目的基因：（1）PCR的含义：一项在生物体外_____特定DNA片段的核酸合成技术。其原理是。（2）前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。（3）过程：目的基因DNA受热变性后解链为，与相应互补序列结合，

2、然后在作用下进行延伸，形成DNA。（4）方式：成______形式扩增（约为_____，其中n为扩增循环的次数）。6.人工合成法：当基因较，核苷酸序列时，可以通过DNA合成仪用化学方法直接合成。7.基因工程的核心是什么？目的是什么？8.一个基因表达载体由什么组成？各有什么功能（作用）？9.什么是转化？10.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是什么?除此之外，还有什么方法？11.转基因动物中采用最多，最为有效的将目的基因导入动物细胞的方法是什么？12.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用___处理细胞，使细胞处于一种_________________的生理状态，这种细胞称为_

3、_________。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与细胞混合，在一定的温度下促进细胞吸收DNA分子，完成转化过程。13.目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是什么？检测方法是什么？14.检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是什么？检测方法是什么？15.检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是什么？除了上述分子检测外，有时还需要进行什么水平的鉴定？三、预习自测1.下列有关基因工程操作顺序的组合中，正确的一组是（）①目的基因的检测与表达②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞④目的基因的提取A、①②③④B、④③②①C、④②③①D、③④②①2.下列有关基因工程技术

4、的叙述，正确的是()A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和基因进入受体细胞的载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少D．只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.下列属于获取目的基因的方法的是()①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取④利用PCR技术⑤利用DNA转录⑥人工合成A．①②③⑤B．①②⑤⑥C．①②③④D．①②④⑥四、提出疑惑同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑？课内探究案一、学习目标及重难点：1、简述基因工程原理及基本操作程序。2、尝试设计某一

5、转基因生物的研制过程。学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤。学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。二、学习过程（一）目的基因的获取1.PCR技术与DNA复制有何异同比较项目DNA复制PCR技术不同点场所酶引物温度相同点2.如何区分不同的基因文库？（见课本第10页表格）（二）基因表达载体的构建1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？2.基因表达载体的构建需要哪些工具酶？3.将目的基因与运载体混合并用DNA连接酶处理后，会出现几种结果？（三）将目的基因导入受体细胞1.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，

6、你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？若想将一个抗病基因导入单子叶植物，你应该如何做？2.比较将目的基因导入受体细胞的方法 生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法受体细胞转化过程（四）目的基因的检测与鉴定1.为什么要有“目的基因检测与鉴定”这一步？2.分子检测过程中，有哪几种杂交带？各说明什么问题？三、反思总结基因工程的基本操作步骤主要方法、技术或组成步骤一：步骤二：步骤三：导入植物细胞：导入动物细胞：导入微生物细胞：步骤四：β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠

7、杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？四、当堂检测1.下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B.细菌质粒是基因工程常用的运载体C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNAD.为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为载体2.PCR技术扩增DNA，需要的条件是（　　） ①目的基因　②四种脱氧核苷酸　③DNA聚合酶等　④mRNA　⑤核糖体⑥RNA引物 A．①②③⑥     B．②③④⑥C．①②③