植物组培室基本设备及培养基配置.doc

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1、植物组培室基本设备及培养基配置一、实验目的：了解植物组织培养实验室的基木设备及其用途、并掌握使用方法；学习培养基的配制方法。二、实验过程：（一）组培室基本设备：1、超净工作台：由鼓风机、屮效及高效过滤板、紫外灯、照明灯、工作台面、控制面板组成。2、高压灭菌锅：由内锅、外锅、进水口、出水口、安全阀、排气管、压力表、电热管等组成。3、其它设备：天平、冰箱、培养架、接种器具、培养瓶及其它一般实验室常用仪器、玻璃器皿等。（二）培养基配制：（以配制1升MS培养基为例）1、母液配制；2、1升MS培养基配制:实验二植物茎段培养一、试验目的：以植物茎段为外植体，诱导茎段侧芽萌发形成单

2、芽。二、实验材料：木蒋带腋芽的茎段。三、实验设备：超净工作台，各种接种用具等。四、实验方法：1、取1—3月龄木薯幼茎，切成带一个节的约1.5cm长的茎段，用自来水冲洗5分钟，2、接种前，打开超净工作台紫外灯20-30分钟，关紫外灯，打开风机20分钟，用75%酒精擦超净台台血。接种人员洗净双手，用75%酒精擦双手，然后可以开始接种。3、在超净工作台内，用0.1%升汞溶液浸泡木薯茎段8-9分钟，无菌水冲洗3—5次。接种于MS+6・BA3mg/L的培养基屮。4、3天后可观察是否污染，7天左右可观察到腋芽是否萌发。5、待侧芽长出4—5节时，可将腋芽剪成带1—2个腋芽的节段，继

3、代进行增殖培养。实验三百合鳞片培养一、实验目的：通过百合鳞片培养，诱导不定芽形成。二、实验材料：百合鳞茎三、实验设备：超净工作台，各种接种用具等。四、实验方法：1、把百合鳞茎剥开，洗去上面泥土，用洗衣粉溶液浸泡lOmin,白来水冲洗5min,再用高猛酸钾溶液浸泡lOmin,自来水冲洗lOmino2、接种前，打开超净工作台紫外灯2Q-30分钟，关紫外灯，打开风机20分钟，用75%酒精擦超净台台面。接种人员洗净双手，用75%洒精擦双手，然后可以开始接种。3、在超净工作台内用75%酒精表面灭菌30s,无菌水冲洗一次，0.1%HgCl溶液屮灭菌12min,再用无菌水冲洗5—6

4、次，接种于MS+6-BA33mg/L的培养基屮。4、约1〜2周后可观察到不定芽形成。仪器名称仪器型号供应商数量医用小推车两层（万向轮）托普云农科技10培养架1400*540*2130mm托普云农科技74超净工作台SW-CJ-2FD苏州安泰10干热灭菌器LDZM-40KCS上海申安10银子不锈钢26cm市购30剪刀市购20盘子，接种盘市购高压灭菌锅LDZH-200KBS申安1高压灭菌锅LDZX-50KBS屮女2天平（万分Z—）FA2004B精科1天平（千分Z—）JA2603B精科1天平（百分Z-）YP802N精科1天平（十分之）YP2001N精科1PH计PHS-3C般特

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