临床医学毕业论文清毒栓对宫颈癌siha细胞及pten-mdm2-p53网络环路的影响.doc

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1、XX大学毕业论文清毒栓对宫颈癌SiHa细胞及PTEN-MDM2叩53网络环路的影响姓名：2014年6月25日清毒栓对宫颈癌SiHa细胞及PTEN-MDM2-p53网络环路的影响【摘要】H的从细胞生物学及分子生物学水平探讨清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖抑制及对PTEN-MDM2-p53网络屮各个蛋口表达的影响。方法以4%含药血清培养液作用于SiHa细胞，设立正常对照组、空白血清组、清毒栓组、保妇康栓组及干扰素组，通过MTT法检测含药血清对细胞增殖抑制的影响；同吋运用Westernblot法检测PTEN・MDM2-p53蛋白的表达情况。结果经含药血清培养液作用后

2、各组细胞数量减少，其屮以4%浓度含约血清作用72h吋对细胞抑制作用最强，与空口血清组比较，差异有统计学意义(P<0.01)；同时，含药血清可升高PTEN、P53抑癌蛋片的表达，降低癌蛋AMDM2的表达。结论清毒栓含药血清可能是通过调控PTEN-MDM2-P53网络环路而达到抑制肿瘤的H的。【关键词】清毒栓；宫颈癌；SiHa细胞；PTEN-MDM2-p53网络Abstract：ObjectiveTodiscusstheeffectofQingdushuanonSiHacellsofcervicalcancerproliferationandproteinexp

3、ressioninPTEN-MDM2-p53networkfromthelevelofcellbiologyandmolecularbiology.MethodsSiHacellswerecultivatedwith4%containingscrum.Normalcontrolgroup,blankscrumgroup,Qingdushuangroup,Baofukanggroupandinterferongroupwereestablished.TheinfluenceofinhibitingandproliferatingSiHacellwasdetec

4、tedbyMTTassay.ThreeproteinexpressionwasdetectedbyWesternblotmethod.ResultsAfterculturedwithdrugcontainingscrum,thenumberofcellsdecreased,4%concentrationofscrumfor72hwasthestrongest・Comparedwiththecontrolgroup,thereweresignificantdifferences(P<0.01).Atthesametime,drugcontainingscrum

5、elevatedexpressionoftumorsuppressorproteinofPTENandp53,reducedcancerproteinexpressionofMDM2.ConclusionQingdushuancontainingserumcaninhibittumorthroughregulatingPTEN-MDM2-p53network.Keywords：Qingdushuan；Cervicalcancer；SiHacells；PTEN-MDM2-p53network子宫颈癌是发展屮国家妇女最常见的恶性肿瘤，居女性生殖器官恶性肿瘤的首位

6、。研究表明,高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染是宫颈癌发生的必要条件，宫颈癌成为H前人类所有癌症屮唯一病因明确的癌症、唯一可以预防的癌症。近年来，屮医药在治疗女性生殖道HR・HPV感染方面取得了一定的成效，但其作用机制不明。H前，对抑癌蛋白研究'I^PTEN-MDM2-p53网络调控成为近年来的研究热点。笔者针对这一网络环路，探讨屮药在PTEN-MDM2-p53网络调控方面的作用机制，进一•步研究屮药在HR・HPV相关宫颈癌细胞屮抗病毒、抗肿瘤的机制。1实验材料1」动物选取SD雌性人鼠40只,体重为200〜250g,购自北京维通利华实验动物技术有限公

7、司，许可证号：京动许字(2000)第004号总049号。1.2试剂胎牛血清购自元亨圣马公司,DMEM全培养液购自美国G1BCO公司，青霉素和链霉索购自华北制药厂』夷酶及EDTA购于SERVA公司及赛多利斯公司,噬卩坐蓝(MTT)购于北京欣源佳和牛物科技有限公司，二甲基亚M(DMSO)为上海华舜产殆，一•抗PTEN为小鼠单克降抗体(SantaCruz),一抗p53为小鼠单克隆抗体(上海博士德公司)，-•抗MDM2为小鼠单克隆抗体(SantaCruz),二抗为辣根酶标记山羊抗兔IgG和辣根酶标记兔抗小鼠IgG(北京屮杉金桥公司)。蛋白质分子量Marker(美国M

8、BI公司)，硝酸纤维索膜(美国Millipore公司