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时间:2020-03-24
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1、金边瑞香不定芽的增殖培养陈志萍闵炜(上海农林职业技术学院,上海松江:201600)摘要:通过两次单因子试验,研究BA(0.5*5mgL'1)和NAA(0.1-ling-L'1)在金边瑞香不定芽增殖培养中的作用。BA在诱导产生不定芽的过程中起着主导作用。BA浓度在O^mg-L-1时,培养6周产生的不定芽总数不多,但有效芽(>Icm)相对较多,平均3.9个,随着BA使用浓度增加,产生的不定芽总数增多,但有效芽数最减少,BA浓度在3mg-L'1以上时,平均只有I个有效芽。NAA浓度在0.2~0.5mg.L?范围内,平均有效芽
2、数在3.8~3.6个,浓度増加到1吨2时,有效芽数减少到平均1.8个。试验确定合适的不定芽增殖培养基为MS+BA0.5mg-L'l+NAA0.2mgL_,o关键词:组织培养;金边瑞香;不定芽増殖;单因子试验金边瑞香(Daphanodoravar.marginata)是瑞香科瑞香属的一个变种,叶缘金黄色,花淡紫红色,气味芬芳,与长春和尚君子兰、日本五针松一起被推崇为近代园艺三宝,为我国传统名花,也是世界名花而倍受人们喜爱,其市场销量也FI益增长。在金边瑞香的产地仍然以杆插繁殖为主,这种繁殖方式容易使带病毒的植株繁殖后导致后
3、代产生退化血影响其观赏价值。通过茎尖纽•织培养可以减少后代植株的病毒,血且繁殖系数大,适合于工厂化育苗。本试验在获得金边瑞香茎尖试管芽苗的基础上,研究细胞分裂素和生长素在其纽•织培养快速増殖中的作用。1材料和方法1.1试验材料切収在初代培养基中生长的金边瑞香愈伤组织上再生的2〜3cm长的健壮芽苗,转接入不含植物生长物质的MS培养基(MSO)中,经二周左右的短期培养,选叶片展开、生长状况较一致的芽苗作增殖培养的材料。1.2培养基增殖培养基为MS基本培养基,添加3%蘆糖,并附加不同浓度的生长素(NAA)和细胞分裂素(BA),
4、pH值5.8。根据前期试验的结果,设置两次单因子试验來分步筛选最佳的BA和NAA的浓度配比。首先固定NAA的浓度为O^mgL'1,BA浓度变化在0.5〜5mg.L」范围,BA和NAA的配比纽合见表1。表1NAA0.2和BA不同浓度组合Table1CombinationofNAA0.2andBAwithdifferentconcentrations编号处理组合(mg-L'1)1MS+BA0.5+NAA0.22MS+BA1+NAA0.23MS+BA2+NAA024MS+BA3+NAA0.25MS+BA4+NAA0.26MS+
5、BA5+NAA0.2根据第一次试验的结果,再固定BA的浓度为O^mgL1,NAA浓度变化在0.1〜lmg.L"范围,得BA和NAA的配比组合见表2。[收稿日期]2008-10-29[作者简介]陈志萍(1971-),女,广西梧州人,副教授,1993年毕业于北京农业大学园艺系观赏园艺专业。Table2CombinationofBA0.5andNAAwithdifferentconcentrations编号处理组合(mg・L“)1MS+BA0.5+NAAO.12MS+BA0.5+NAA0.23MS+BA0.5+NAA0.54M
6、S+BA0.5+NAAI1.3试验方法将在MSO培养基中生长状况较一致的芽苗剪成2cm-K.转入分装50ml不同处理培养基的直径为6cm的培养瓶中,每瓶接一枚芽苗,每个处理接20瓶。培养温度24±1°C,光照强度20gmol.m-2.s1,光照时间12h.d_1o接入增殖培养基后一•周开始观察各处理芽苗的生长状况,至第6周调查记录增殖的芽苗数,以大于lcm长的芽为有效芽,按随机设计进行方差分析山,比较各处理的差异。2结果与分析2.1BA对芽苗增殖生长的影响2.1.1BA对芽苗生长的影响BA的使用浓度在0.5mgL1时,培
7、养6周芽苗的顶芽伸长lcm左右,茎基部生直径1〜2cm左右的蓬松愈伤组织,上而萌生不定芽,长2〜3cm,叶片展开正常。BA使用浓度在lmg-L1吋,顶芽伸长量比在O^mgL1时耍少,茎基部生直径3cm左右的蓬松愈伤团块,上面的不定芽粗短,大部分的长度不到lcm,并且叶片小血尖。BA浓度在2mg・L/时,茎基部的愈伤团更大,上面的不定芽小而密集,长度大于lcm以上的有效芽仅1〜2枚。当BA使用浓度增加到至5mgL】时,接入的芽苗茎杆从屮上部就开始肿大开裂,呈疏松的海绵状,愈伤团增大,但不定芽的数彊减少,长度也都在0.5cm
8、以下,有效芽都在1枚左右(见图版1)。2.1.2BA对不定芽增殖的影响培养6周后计算各处理中芽苗增殖的有效芽数(长度大于lcm的不定芽),去除统计中岀现的极端值,为方便计算,都取14个观察值(如表3),対表3的数据作方差分析,得表4。表3BA6种处理的有效芽数统计Table3Statisticalformofthen
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