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时间:2020-03-23
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1、溶液的准确量取移液枪操作规范及注意事项一、操作规范1量程选择为确保更好的准确性和精度,建议移液量在吸头的20(10)%-100%量程范围内,建议适当使用量程范围如表1:表1移液枪建议有效使用范围量程(μL)有效范围(μL)100.5~10202~2010020~10020050~2001000200~100050001000~50002吸头安装将枪头套筒顶端插入吸头(移液枪与吸头要相匹配,吸头规格见表2)。轻轻用力下压的同时把手中的移液枪按逆时针方向旋转180度。切忌用力过猛,更不能用跺吸头的方法来进行安装,因为那
2、样做会对移液枪造成不必要的损伤。表2移液器通用标准吸头规格枪头量程(μ有效范围(μL)颜色L)100.5-10白色短尖/白色长尖200.5-20白色长尖10010-100黄色20020-200黄色1000100-1000蓝色50001000-5000白色枪头卡紧的标志是略微超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰地密封圈。另外,吸取一定量的液体后垂直静置移液枪,如果没有液体往下滴也表明枪头密封良好。3容量设定正确的容量设定分为两个步骤:一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近
3、自己的预想值以后,应将移液枪垂直放置在眼前,平视,慢慢将容量值调至自己的预想值,从而避免视觉误差造成的影响。在容量设定时,从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,需要超过设定容量1/3圈后再返回,因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。4预洗枪头从理论上讲,安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放2-3次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。注意:对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性,但对于高温或低温样品,吸头润洗会降低
4、操作准确性。5吸液与放液5.1前进移液法(常用方法)用大拇指将按钮按下至第一停点,吸头浸入液体中(浸入倾斜度控制在20度之内,保持竖直为佳;浸入深度如表3),然后慢慢松开按钮回原点,松开时一定要保持平稳,速度适中。过快的吸液速度容易导致跳液现象,造成样品浸入套柄,带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。将枪头头部靠在器壁上,约成10°~20°倾角,慢慢按下推动按钮直到遇到一个阻力(第一停点),停1~2s,继续推至终点(第二停点),完全排出液体,保持推动按钮至终点的状态取出移液器。表3吸头浸入深度参考移液枪规格吸头
5、浸入深度2μL和10μL<1mm20μL和100μL2-3mm200μL和1,000μL3-6mm5,000μL和10,000μL6-10mm5.2反向移液法此法一般用于转移高粘度液体,生物活性液体,易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余液体。具体操作如下:先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点,接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点,取下有残余液体的枪头,弃之。为避免液体浸入枪体,不建议在满量程情况下进行此项操作。6卸掉吸头按下
6、卸枪头按钮,退下吸头(有的移液器不带卸枪头器,则手动卸除吸头)。使用过的吸头一定不能和未使用的新吸头混放,以免导致交叉污染。移液枪使用完毕后需将量程调至最大值,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧,同时将移液枪垂直挂在移液枪架上。二、移液枪使用过程中的注意事项1、勿将移液枪浸入溶液中;2、转移挥发性液体,如醋酸、盐酸、乙醇、电泳染色液、脱色液等,请使用移液管;3、不可吸取温度过高(70℃)的液体,以免蒸汽浸入枪体腐蚀活塞;4、套有吸头的移液枪,不论吸头中是否有液体,请保持枪体垂直,请勿倾斜或平放甚至倒置,谨防液体流入活塞室
7、腐蚀移液枪活塞;5、移液枪使用完毕后一定将量程调至刻度最大值,垂直挂在枪架上;6、如果发现枪体污染,或在操作过程中出现液体进入枪体的现象,请及时与仪器负责人员联系。刻度移液管的使用和注意事项常用的移液管有1,2,5和10mL等规格。1.移液管使用前首先要看一下移液管标记(是否标“吹”)、准确度等级、刻度标线位置等。2.吸液:用右手的拇指和中指捏住移液管的上端,将管的下口插入欲吸取的溶液中,插入不要太浅或太深,一般为10~20mm处,太浅会产生吸空,把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液,太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿吸耳球
8、,接在管的上口把溶液慢慢吸入,先吸入该管容量的1/3左右,用右手的食指按住管口,取出,横持,并转动管子使溶液接触到刻度以上部位,以置换内壁的水分,然后将溶液从管的下口放出并弃去,用吸耳球从上端管口吹气,将末端保留溶液吹走,然后,用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉。如此用反复洗3次后,即可吸取溶液至刻度以上,立即用右手的食指按住管口。3.调节液面:将移液管向上提
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