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《藕合型生物毒素BtA的杀虫作用机理研究(共享).doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、藕合型生物毒素BtA的杀虫作用机理研究作者：朱育菁、潘志针通讯作者：刘波单位：福建省农业科学研究院农业生物资源研究所摘要本研究采用新型的藕合体系(NHS+EDC)实现Bt毒素与阿维菌素的藕合，并利用荧光滴定的手段，测定藕合产物BtA的本征结合常数为6.44pmol/L,藕合位点数为5个。以小菜蛾为实验对象，研究藕合毒素BtA的杀虫毒力，发现BtA的杀虫毒力为Bt的5.6o提取小菜蛾屮肠上皮细胞刷状缘膜(BBMV),利用OctetREDSystem平台，研究BtA与BBMV相应受体结合常数，解离常数以及亲和常数，结果表明BtA与BBMV相应受体的和互作用力要强于Bt,从分
2、子水平解释BtA的杀虫作用机理。1、项目背景项H来源：福建省杰出青年自然基金“藕合型生物毒素BtA的杀虫作用机理研究”(2009J06010)；参加人员为:朱育菁,阮传清，刘芸，葛慈斌;经费:30万元;实施年限2009.7-2012.62、研究概述苏云金芽泡杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)是口前世界上应用最广泛的微生物杀虫剂，对鳞翅门、鞘翅F1、双翅H、膜翅冃、同翅H等昆虫都有特异性的毒杀活性，专—•性强、效果好、无污染，而对非H标生物安全，因此苏云金芽抱杆菌一直是农业害虫生物防治的研究热点(Bravoetal.,2007;Frankenhuyz
3、en,2009)o但是，随着Bt杀虫剂的大面积的使用及其转Bt植物的大范围的推广，农业害虫对Bt毒索的抗性亦逐年增加(Lebeletal,2009)o因此，如何有效的缓解农业害虫对Bt毒索的抗性，成为Bt杀虫剂研究领域的新热点。害虫对农纱抗纱性就是延缓农纱位点作用，使之失效、钝化。每一种农勿对害虫都有一个主要作用位点，每一种害虫都存在多个农药作用位点(CravediandMazzoni,2000)。害虫对含有多个作用位点的农药产生抗约性比含有单一作用位点的农药更困难(Wrightctal.,1997)。具有两个以上作用位点的农药称Z为多位点杀虫毒素。利用生物藕合技术在B
4、t毒素上增加-•个或多个杀虫作用位点，可形成Bt毒素的多位点杀虫毒素，是缓解Bt抗性的最具前景的方法(AdachiandFutai,1992,ScngoncaandLiu,2001)。荧光光谱法能提供许多荧光参数如激发光谱、发射光谱，荧光强度、量子产率和荧光寿命等，这些参数能从各个角度反映分子的成键和结构情况以及荧光特性。通过对这些参数的测定，可得到许多蛋白质与小分子相互作用的信息如结合藕合型生物毒素BtA的杀虫作用机理研究作者：朱育菁、潘志针通讯作者：刘波单位：福建省农业科学研究院农业生物资源研究所摘要本研究采用新型的藕合体系(NHS+EDC)实现Bt毒素与阿维菌素的
5、藕合，并利用荧光滴定的手段，测定藕合产物BtA的本征结合常数为6.44pmol/L,藕合位点数为5个。以小菜蛾为实验对象，研究藕合毒素BtA的杀虫毒力，发现BtA的杀虫毒力为Bt的5.6o提取小菜蛾屮肠上皮细胞刷状缘膜(BBMV),利用OctetREDSystem平台，研究BtA与BBMV相应受体结合常数，解离常数以及亲和常数，结果表明BtA与BBMV相应受体的和互作用力要强于Bt,从分子水平解释BtA的杀虫作用机理。1、项目背景项H来源：福建省杰出青年自然基金“藕合型生物毒素BtA的杀虫作用机理研究”(2009J06010)；参加人员为:朱育菁,阮传清，刘芸，葛慈斌;
6、经费:30万元;实施年限2009.7-2012.62、研究概述苏云金芽泡杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)是口前世界上应用最广泛的微生物杀虫剂，对鳞翅门、鞘翅F1、双翅H、膜翅冃、同翅H等昆虫都有特异性的毒杀活性，专—•性强、效果好、无污染，而对非H标生物安全，因此苏云金芽抱杆菌一直是农业害虫生物防治的研究热点(Bravoetal.,2007;Frankenhuyzen,2009)o但是，随着Bt杀虫剂的大面积的使用及其转Bt植物的大范围的推广，农业害虫对Bt毒索的抗性亦逐年增加(Lebeletal,2009)o因此，如何有效的缓解农业害虫对Bt毒
7、索的抗性，成为Bt杀虫剂研究领域的新热点。害虫对农纱抗纱性就是延缓农纱位点作用，使之失效、钝化。每一种农勿对害虫都有一个主要作用位点，每一种害虫都存在多个农药作用位点(CravediandMazzoni,2000)。害虫对含有多个作用位点的农药产生抗约性比含有单一作用位点的农药更困难(Wrightctal.,1997)。具有两个以上作用位点的农药称Z为多位点杀虫毒素。利用生物藕合技术在Bt毒素上增加-•个或多个杀虫作用位点，可形成Bt毒素的多位点杀虫毒素，是缓解Bt抗性的最具前景的方法(AdachiandFutai,1992,Scngon
