抗原抗体反应的特点.ppt

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1、第二节抗原抗体反应抗原抗体反应的化学本质抗原抗体反应的特点影响抗原抗体反应的因素抗原抗体反应的化学本质结构基础抗原抗体的结合力反应过程抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合不形成牢固的共价键，通过非共价键结合这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力一、抗原抗体结合力一、抗原抗体结合力*1．静电引力*2．范德华引力*3．氢键结合力*4．疏水作用力静电引力（库伦引力）（electrostaticforces）（coulombicforces）概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力。引力的大小与

2、两个相互作用基团间的距离的平方成反比；平均键能约为20.9kJ/mo1。范德华引力（VanderWaalsforces）概念：抗原和抗体相互接近时，由于分子的极化作用而出现的引力。结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比，键能约为4.2～12.5kJ／mol。这种引力的能量小于静电引力。具有特异性。概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。氢键结合力(hydregenbondforces)供氢体：羧基、氨基和羟基受氢体：羧基氧、羧基碳和肽键氧等能的大小取决于氢键的

3、方向：氢键具有高度的方向性。氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。疏水作用力（疏水键）概念：两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由于对水分子排斥而趋向聚集的力。抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间正、负极性消失，亲水层立即失去。此力在抗原抗体反应中的结合是很重要的。提供的作用力最大，约占总结合力的50％。抗原抗体结合力示意图抗原抗体氢键结合力ONONHH静电引力--++范得华力-++-+--+疏水作用力排斥的水二、抗原抗体亲和性（affinity）*亲和性是抗体分子上

4、一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的引力，这是抗原与抗体之间固有的结合力。*亲和力（avidity)是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。亲和力越大，抗原抗体结合越牢固。亲和常数亲和常数K=K值大的抗体与抗原牢固结合，不易解离，说明该抗体有高亲和力。抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体。三、亲水胶体转化为疏水胶体当抗原与抗体结合后，表面电

5、荷减少，水化层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体。在电解质作用下，各疏水胶体之间靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体疏水胶体转化NaCl可见反应抗原抗体反应的特点*1.特异性*2.比例性*3.可逆性一、特异性（specificity）*概念：抗原分子，只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。一、特异性*决定因素：由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。抗体分子N端可变区形成3nm×1.5nm×0.7nm

6、的槽沟，只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。*交叉反应(crossreaction)两种不同的抗原物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇，则可与彼此相应的抗体反应。特异性示意图*最适比(optimalratio)或等价点(equivzlencepoint)最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比。二、比例性（proportionality）等价带(equivalencezone)抗原与抗体分子比例合适的范围。带现象：Ag与Ab比例不适而不出现可见反应。*前带(prozone)抗体过量时。*后带(

7、postzone)抗原过量时。比例性示意图抗体过量比例合适抗原的量抗原过量抗体沉淀的量前带等价带后带三、可逆性（reversibility)概念：是指抗原与抗体结合成复合物后，在一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。解离后抗原抗体仍保持原有特性。一定条件：低pH、高浓度盐等。常用于解离抗原抗体复合物的物质有：3mol/L硫氰化钾、pH2.40.1mol/L甘氨酸、7mol/L尿素等。抗体混有SPAg抗体-SPAg抗体-SPAg分离剂一、抗原抗体结合二、分离抗体可逆性示意图抗体抗原抗体反应影响因素一、反应物

8、自身因素*抗原：1.理化特性2.Ag决定簇数量3.Ag决定簇种类*抗体：1.来源2.特异性与亲和力3.浓度二、环境条件：*电解质：0.85%NaCl*酸碱度：pH6～9*温度：15～40℃第三节抗原抗体反应类型1.沉淀反应2.凝集反应3.补体参与的反应4.中和反应5.免疫标记表抗原抗体反应的基本类型表反应类型实验技术检测方法敏感度沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀、检测浊度+，++++琼脂凝胶扩散观察扫描沉淀线或环+凝