大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)基因分子标记筛选与定位.pdf

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1、万方数据Identificationofmolecularmarkersandmappingforturnipmosaicvirus(TuMV)resistantgeneinChinesecabbage(BrassicarapaL．ssp．pekinensis)ThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfifImentoftheRequirementfortheDegreeof—MasterofScienceZhangXiaoLiang(DepartmentofLifeScience)Supervisor：SongX

2、iyunLiQiaoyunQ．ngdao．ChinaMay,2012万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：渺时间：弘何年了月阳关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、

3、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。【保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：；彦丹红J钆时间：-7,秒1≯年]月y日导师签名：锄二．时间：7q≯年1月咱夕万方数据青岛农业大学硕士学位论文摘要大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)基因分子标记筛选与定位摘要大白菜f，BrassicarapaL．ssp．pekinensis，从，2n=20)是十字花科芸薹属植物，原产于我国，是我国乃至整个东亚地区的重要蔬菜。病毒病是我国大白菜的三大病害之一，研究表明，浸染我国大白菜的主要病原是芜菁花叶病毒病(Tu

4、mipmosaicvirus，简称TuMV)，占病毒分离物的71．9％。传统的育种方法周期长，效率低，而且由于基因间的互作以及外界环境条件等因素的影响，选择的准确性差。利用分子标记辅助选择的方法创新种质，可大大加快育种进程，具有准确、可靠、高效等优点，正在成为现代育种的一种发展趋势。筛选大白菜TuMV抗性基因分子标记及对有关基因进行定位，可为大白菜抗TuMV的分子标记辅助选择奠定基础。本研究选用国家级大白菜TuMV抗原材料8407(P】)和感TuMV的大白菜核心种质材料冠291if,2)为亲本，分别构建了其Fz(P1xP2)、B1(Flxpl)、B2(Flxp2)和F2研究群

5、体，并对上述亲本和群体进行TuMV接种和鉴定，分析其抗性遗传规律。利用108株B2群体为研究对象，采用分离群体分组分析法(BulkedSegregationAnalysis，BSA)，结合表达序列标签SSR(ExperssedSequenceTagsSSR，EST-SSR)标记技术，对大白菜TuMV抗性基因进行了标记和定位，主要结果如下：1．分别对亲本、F1、Bl、B2和F2群体接种TuMV-C4，通过三次调查获得各单株的抗、感数据，结果表明，F1代和B1代的病情指数分别为11．67和20．81，均为抗病；B2群体中抗病单株(47)和感病单株(61)符合1：1的分离比例(#=

6、1．81<#0．05)，F2群体中抗病单株(365)和感病单株(144)符合3：1的分离比例(Z=2．94

7、。同源比对结果表明，在168个SSR万方数据青岛农业大学硕士学位论文摘要中，有83个位于CDS区，649．4％，位于5'-UTR和3'-UTR区的分别是46个和38个。根据上述SSR两翼的序列，共设计引物201对。引物筛选结果表明，能够进行成功扩增的有160对，占79．6％，其中37对引物在两亲本中扩出多态性。3．以B2群体108个单株为研究对象，分别利用11个极端抗病单株和11个极端感病单株构建抗、感池，对37对在两亲本间具有多态性的引物进行扩增，结果表明有4对引物在亲本和抗感池中均有多态性且条带一致