反义OsPDCD5转基因提高水稻耐盐性及LRK1基因影响水稻节间伸长的研究.pdf

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1、目’录万方数据摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1●反义OsPDCD5转基因提高水稻耐盐性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1●LRKl基因影响水稻节间伸长⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯．．．．．．．⋯．⋯．．．．⋯⋯．．．．⋯⋯．⋯．⋯．．．⋯．．．．．⋯．⋯．．．．．⋯．．．．⋯．⋯5eAntisense．OsPDCD5increasesricetolerancetosaltstress⋯⋯⋯⋯⋯．5●LRKlrestrictsinternOdeelongationinrice．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．

2、．．．．．．．．．．．．．．．．．．7一．前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9●1．1植物细胞程序性死亡及其研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9夺1．1．1细胞程序性死亡概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9夺1．1．2植物细胞程序性死亡研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10夺1．1．3PDCD5与osPDCD5⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14·1．2植物与盐胁迫⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14夺1．2-1盐胁迫对植物的危害⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．14令1．2．2植物耐盐的机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．15夺1．2．3耐盐植物育种研

3、究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16·1．3富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯．．17◇1．3．1富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶概述⋯⋯⋯⋯⋯．．17今1．3．2LRR—RLKs的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．17夺1．3．3LRR．RLKs的生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17令1．3．4L尺K7概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．20·1．4赤霉素的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20令1．4．1赤霉素概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20夺1．4．2赤霉素的生物合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21令1

4、．4．3赤霉素的信号转导⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21◇1．4．4赤霉素的生理作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．24◇1．4．5赤霉素的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．25二．材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27◇2．1水稻品种⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27夺2．2试剂盒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27◇2．3水稻cDNA的获取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27>2．3．1水稻总RNA的提取和纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27万方数据>2．3．2反转录反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28夺2．4实时定量PCR(

5、RT-qPCR)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29夺2．5盐胁迫处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．30夺2．6PEG处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．30夺2．7GA处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．30夺2．8PSK处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30夺2．9～F^值的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31◇2．10基因芯片(AffymetrixGeneChip@RiceGenomeArray)⋯⋯31◇2．11内源GA含量的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37三．结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3803．1反

6、义OsPDcD5转基因提高水稻耐盐性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38冷3．1．1转Antisense—OsPDCD5提高水稻耐盐性⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．38>3．1．1．1盐胁迫下对照和转基因植株的表型变化差异⋯⋯⋯．．38>3．1．1．2盐胁迫下对照和转基因植株F。，F矗值的变化差异⋯⋯38夺3．1．2对照和转基因植株中OSPDCD5的表达差异⋯⋯⋯⋯⋯．．39◇3．1．3对照和转基因植株中其它PCD相关基因的表达差异⋯⋯．，41≯3．1．3．1转基因植株中OsBkl表达受抑制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42>3．1．3．2转基因植株中Osll90506800表达受抑制⋯⋯⋯⋯42夺3．1．4对照和转基因植株叶

7、片中基因表达谱分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43>3．1．4．1芯片分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，．43>3．1．4．2实时定量PCR分析验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46冷3。1，5对照和转基因植株中OsCfPK23的表达差异⋯⋯⋯⋯⋯．．48夺3．1．6对照和转基因植株在PEG处理中的差异⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49>3．1．6．1表型差异⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49>3．1．6．2OsPDCD5和OsC『PK23的表达差异⋯⋯⋯⋯⋯